摘要：背景:脂肪组织来源干细胞是位于脂肪基质内的一种细胞,具有多向分化潜能,可以定向分化成多种细胞类型。目的:探索兔脂肪组织来源干细胞体外生长特性及胶原酶消化适宜条件。设计、时间及地点:细胞分子生物学实验,2008-05/09在解放军南京军区福州总医院比较医学科及实验科完成。材料:日本大耳白兔5只。Ⅰ型胶原酶为美国Worthington公司产品,低糖DMEM/F12培养液为美国Gibco公司产品。方法:兔颈后部皮下脂肪取材,采用Ⅰ胶原酶消化法获取细胞,按Ⅰ型胶原酶消化质量浓度分为1.0,1.5,2.0g/L3组,每组再按消化时间分为0.5,1,1.5h3个亚组。脂肪组织剪碎混匀后均分为9等分,最后重悬细胞终体积均定为2mL并计数,每个亚组计数6次,共取5次脂肪组织,采用含血清的DMEM培养液体外培养细胞。主要观察指标:细胞体外生长特性并比较不同胶原酶浓度、胶原酶消化时间对兔脂肪来源干细胞体外培养的影响。结果:采用1.0,1.5,2.0g/L三种不同胶原酶浓度进行消化,发现在消化时间为0.5h和1h时,2.0g/L组消化细胞总数最多,细胞总数与其他组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。在消化时间为1.5h时,消化细胞总数较0.5h和1h均有增加,同时,1.0,1.5,2.0g/L组消化细胞总数无统计学差异,活细胞比值1.0g/L组最高,但与其他组无统计学差异,观察第3代细胞生长特性,1.0g/L消化1.5h组别具有更好的增殖活性。结论:脂肪来源干细胞具有较强的自我更新能力,对于兔脂肪组织来源干细胞,胶原酶浓度1.0g/L、消化时间1.5h是最佳的获取条件。