摘要：在离体条件下，以风信子花被片为外植体，通过控制激素的浓度可诱导花被片，雄蕊或胚珠的再生。近年来，在拟南芥和金鱼草等模式植物中已经分离出了许多控制花器官发育的同源异形基因，如AG，AP1，AP2，AP3等，其中AP2在控制花萼和花瓣形成过程中起重要作用。因此本文从风信子中分离AP2的同源基因，并对它在风信子再生系统中的表达进行了分析。根据AP2同源基因功能域的保守序列设计一对简并引物：5'-TGGGA(A/G)TC(G/T/C)CA(C/T)AT(C/T)TGGA-3'和5'-TCCCA(AGC)(CT)(GT)(AG)CC(AG)CA(CT)TT(AG)TG-3',以再生的花被片为材料进行RT－PCR，扩增出大小约300bp的片段，序列分析表面该片段的氨基酸序列与AP2同源性高达89％，进而，利用5'和3'Race PCR，得到全长的cDNA。该基因命名为HAP2，GenBank登记号9为AF134116，该基因全长1597bp，编码368个氨基酸（Fig.1).与AP2相比，HAP2也含有10个氨基酸长的碱性功能域，其中KKSR为核心定位信号，此外，HAP2也含有两个序列重复的68个氨基酸长的功能域（HAP2－R1，HAP2－R2），HAP2－R1也含有能形成α-螺旋结构的核心区域，且与AP2－R1中的核心充列100×同源，而HAP2－R2中的核心区域与AP2－R2相比，缺少9个氨基酸（Ｆig. s) .RT-PCR结合Southern杂交结果表明（Ｆig.3)。HAP2在叶，花被片中表达，其表达方式与AP2一样，此外，在再生花被片和再生雄蕊中也检测到HAP2的表达，进一步,利用原位杂交技术分析HAP2在风信子花器官再生过程中的表达将对于激素调节的花发育的机理有更深入的理解。

摘要：根据ＡＧ同源基因ＭＡＤＳ Ｂｏｘ的保守性，设计简并引物，进行ＲＴ－ＰＣＲ，从风信子的花器官中分离出ＨＡＧ１基因．分析表明，该基因与ＡＧ的同源基因具有较高的同源性．以ＨＡＧ１ ＭＡＤＳ Ｂｏｘ以外的３’端序列为模板合成探针，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，在根和叶片中未检测到ＨＡＧ１ ｍＲＮＡ的积累，但在处于花粉母细胞和单核花粉时期的花器官中其ＲＮＡ的积累水平则相当高．利用ＰＣＲ技术，并结合序列测定方法，从低激素浓度条件下分化再生雄蕊的花芽中检测到ＨＡＧ１的片断，而从高激素浓度条件下分化再生花被片的花芽中未检测到该片断，推测激素浓度、同源异形基因及花器官特征之间存在密切联系．

摘要：黄瓜花发育的早期均有雌蕊和雄蕊原基的分化，但在发育过程中，由于雌蕊或雄蕊的发育受到阻滞，导致雄花和雌花的形成。近年来在拟南芥和金鱼草等植物中遗传学的研究表明，花器官的特征是由同源异形基因决定的。在拟南芥中，由于ＡＧ在决定雄蕊和雌蕊特征方面起重要作用，本研究利用 ＲＴ－ＰＣＲ技术，从黄瓜的雌、雄蕊中分离出 ＡＧ的同源基因，并对其在花发育过程中的表达和可能作用进行了分析。首先，根据ＡＧ同源基因的保守区域设计５’简并引物５’－ＧＡ（Ａ／Ｇ）ＡＴ（Ｔ／Ｃ／Ａ）ＡＡ（Ｔ／Ｃ／Ａ）ＡＡ（Ｇ／Ａ）（Ａ／Ｃ）Ｇ（Ｇ／Ｔ／Ｃ）ＡＴＣＧＡ（Ｃ／Ａ）ＡＡＣ－３’，然后进行３’，ＲＡ ＣＥ ＰＣＲ，扩增出约１ｋｂ大小的片段，序列分析表明该片段含有非常保守的ＭＡＤＳ ｂｏｘ。进而，利用５’ ＲＡＣＥ ＰＣＲ得到全长度的ｃＤＮＡ。该ｃＤＮＡ的核苷酸序列与ＣＵＭ１（黄瓜 ＭＡＤＳ ｂｏｘ ｇｅｎｅ１）同源性高达９７％。 ＣＵＭ１在接牵牛中过量表达可引起花萼变为心皮状和花瓣变为雄蕊，说明ＣＵＭ１为ＡＧ的同源基因。基于该基因与ＣＵＭ１序列上的高度同源，我们认为其为黄瓜的ＡＧ同源基因。该基因命名为ＣＭＢ１，基因银行登记号为ＡＦ２８６６４９。Ｓｏｕｔｈｅｒ