摘要：目的观察SSB抗原与DNA抗原共同免疫动物时不同抗体滴度的变化,研究合成SSB/La多肽与DNA共同免疫动物是否导致DNA抗体产生抑制。方法根据人SSB抗原cDNA编码的氨基酸序列,设计合成214-225位的12个氨基酸多肽,将人工合成多肽与血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyan in,KLH)进行耦联,与ds-DNA、SSB联合DNA、KLH、PBS分别作为抗原对5组家兔进行免疫,用ELISA法检测产生的抗体。并取动物心、肝、肾、脾和皮肤进行组织学检查和免疫荧光检测。结果ELISA法检测发现,不同抗原免疫家兔均能诱导相应抗体产生。联合免疫组SSB/La抗体的滴度明显高于单独SSB免疫组,而dsDNA抗体的滴度明显低于单独免疫组。此外,混合免疫组中同一家兔SSB抗体效价显著高于DNA抗体效价。免疫后未发现动物以上器官组织学改变。结论SSB多肽、DNA免疫家兔后抗体产生规律存在差异,合成SSB/La多肽与DNA共同免疫家兔后可导致DNA抗体产生抑制。

摘要：通过凝胶滞留分析和荧光素酶报告基因检测系统 ,鉴定出人类 β珠蛋白基因 5′旁侧远端帽位上游 - 2 1 32～ - 1 82 2 bp间存在一个活性沉默子片段 (31 0 bp) ,将其亚克隆至p UC- T载体中 ,然后采用人工设计的突变引物 ,将经 DNA足纹分析确定的两个结合位点的核心基序 (β珠蛋白基因帽位上游 - 2 0 1 7～ - 2 0 1 1 bp间的“CTTCCGC”序列和 - 2 0 0 6～ -1 997bp间的“CACTTTATTT”序列 )分别定点诱变为“CTTAAGC”和“CACTTAAGTT”两个突变序列 ,从而构建成两种突变型 31 0 bp片段 ,可用于对活性沉默子位点的结构与功能及β珠蛋白基因表达调控机制的深入研究 .