摘要：【目的】建立Ⅰ型鸭病毒性肝炎(Duck hepatitis virus,DHV)的反向遗传系统。【方法】根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)ZJ-V/2006株全基因组序列设计并合成5对特异引物,进而应用RT-PCR技术分5段扩增了DHV全基因组cDNA。将扩增的cDNA重叠片段A、B、C和DE片段分别克隆到载体pBluescriptⅡKS(+)中,获得了DHV-ⅠZJ-V/2006株全长基因组cDNA克隆pBLDHV。在扩增5′末端时,引入ApaⅠ酶切位点和SP6启动子序列;在基因组3′末段PolyA尾引入NruⅠ酶切位点,以供cDNA模板的线性化之用。【结果】核酸序列分析表明,DHV-ⅠZJ-V/2006株基因组全长为7 711个核苷酸,与DHV-ⅠZJ-V BHK-21细胞分离株的同源性为99.9%;全长基因组中有6个核苷酸发生突变,均未导致对应的氨基酸发生改变,为沉默突变。【结论】成功构建了DHV-ⅠZJ-V/2006株基因组全长cDNA。

摘要：为了研究猪瘟病毒(CSFV)对IFN-β产生的影响,我们利用荧光素酶报告基因系统测定了CSFV Shimen株感染猪肾细胞PK15后人源IFN-β启动子的诱导情况,以及以新城疫病毒(NDV)作为诱导剂建立了细胞内IFN-β诱导的模型,基于该模型,我们探讨了CSFV对病毒活化的IFN-β启动子的影响。研究表明,不管条件如何改变,CSFV Shimen株都不能诱导活化IFN-β启动子。NDV可以有效诱导激活IFN-β启动子,且能与CSFV共感染同一个PK15细胞。深入研究发现,CSFV Shimen株能很好地抑制NDV对IFN-β启动子的活化,尤其是CSFV先于NDV感染或两病毒同时感染PK15细胞时,抑制效果最为明显。CSFV的这种抑制IFN-β启动子激活的特性在一定程度上解释了猪瘟病毒持续感染的机理,为抗病毒药物的设计和新药的开发以及病毒病的治疗提供了一定的借鉴。

摘要：根据Ⅰ型鸭病毒性肝炎ZJ/06强毒株的测序结果,在其基因组3D基因区设计合成一对可扩增238 bp的特异性引物,成功的建立了检测DHV-Ⅰ的RT-PCR方法,并确定了其特异性与敏感性,对DHV-Ⅰ分离毒株和临床病料进行RT-PCR检测均得到阳性扩增结果,而作为阴性对照的常见4种鸭病病原:鸭瘟病毒、鸭产蛋综合症病毒、鸭副粘病毒、鸭里默氏杆菌均未扩增到任何片断。利用BHK-21细胞、SPF鸡胚对DHV-Ⅰ临床病料进行病毒分离鉴定,结果表明建立的DHV-Ⅰ的RT-PCR检测方法具有快速、特异、敏感的特点。

摘要：为研究饲粮添加抗氧化剂对热应激条件下蛋鸡肠道结构的影响,选取2400只35周龄海兰蛋鸡随机分为5组,每组4个重复,每个重复120只,分为A组(200 mg/kg姜黄素+基础日粮)、B组(150 mg/kg添加剂A+基础日粮)、C组(100 mg/kg姜黄素+150 mg/kg添加剂A+基础日粮)、D组(150 mg/kg添加剂A+200 mg/kg添加剂B)和O组(对照组,基础日粮),其中添加剂A含2%茶多酚,添加剂B含≥300亿乳酸菌,7 d预试期,42 d正试期。结果显示:与O组相比,A组蛋鸡空肠、回肠的绒毛高度与黏膜厚度显著提高(P<0.05);B组添加剂能够显著提高蛋鸡空肠、回肠、十二指肠的绒毛高度及黏膜厚度(P<0.05),且显著提高空肠的绒毛高度/隐窝深度(V/C)值(P<0.05);C组蛋鸡空肠、回肠、十二指肠的绒毛高度、V/C值及黏膜厚度显著提高(P<0.05)。另外,相对A、B、C组,D组的十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度与V/C值均有显著提高(P<0.05)。结果表明:姜黄素、茶多酚和微生态制剂等添加剂对热应激条件下蛋鸡肠道损伤有一定缓解作用,且以基础日粮中添加100 mg/kg姜黄素+150 mg/kg添加剂A改善效果最为显著。

摘要：旨在研究枯草芽孢杆菌与地顶孢霉复合制剂对蛋鸡生产性能、蛋品质及相关肠道指标的影响。试验选用30周龄的海兰蛋鸡240只,随机分为复合添加剂试验组和对照组,每组4个重复,每个重复30只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加浓度为5×10^(8) CFU枯草芽孢杆菌和地顶孢霉的复合制剂。试验预试期1周,试验期12周,每天记录生产数据,在试验的第1、7和13周收取蛋样测定蛋品质,并在1周龄与13周龄进行抽样屠宰,取盲肠内容物分析盲肠菌群。结果显示:与对照组相比,复合制剂极显著提高了蛋鸡的产蛋率(P0.05);枯草芽孢杆菌与地顶孢霉复合制剂对蛋型指数、蛋重、哈夫单位和蛋壳厚度均无显著影响(P>0.05),但极显著提高了第1周的蛋黄重(P0.05),但极显著降低了大肠杆菌的数量(P<0.01)。结果表明,产蛋鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌和地顶孢霉复合制剂能够提高蛋鸡生产性能、蛋品质并降低肠道中大肠杆菌的数量,改善肠道菌群结构。