摘要：【目的】构建针对奶山羊肝脏X受体α(Liver X receptorα,LXRα)基因的干扰腺病毒载体。【方法】根据奶山羊LXRα基因CDS区域设计小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),分别构建pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA及pDsRed1/C1-LXRα载体,共转染HEK 293细胞,48h后观察其荧光蛋白表达量,筛选出具有明显干扰效应的shRNA。将具有明显干扰效应的shRNA载体与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST在LR ClonaseTMⅡ重组酶的作用下进行重组,经氨苄青霉素及氯霉素抗性筛选后获得重组腺病毒载体。将构建好的重组腺病毒载体经PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK 293细胞,培养7～10d后收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液,反复扩增3次后,获得高滴度的重组腺病毒,测定其病毒滴度。【结果】①设计出了shRNA-490、shRNA-496、shRNA-509和shRNA-923 4条shRNA序列;②得到shRNA-490和shRNA-923 2条具有明显干扰效应的shRNA;③获得pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-490和pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-923 2个重组腺病毒载体,ScaⅠ酶切及测序结果均正确,2个腺病毒重组载体滴度均为5×108 PFU/mL。【结论】奶山羊LXRα基因重组shRNA腺病毒载体构建成功,为利用RNA干扰技术研究LXRα基因在乳腺上皮细胞中的功能奠定了基础。

摘要：旨在克隆奶山羊GPR41(G protein-coupled receptor 41)基因并分析其组织表达谱,为进一步探讨其功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人和鼠的GPR41基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR方法克隆奶山羊GPR41基因,利用实时荧光定量PCR方法分析奶山羊GPR41mRNA表达的组织特异性。测序结果表明奶山羊GPR41基因的CDS区为978bp,共编码325个氨基酸。奶山羊GPR41基因序列同源性分析表明:其与牛、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为96%、78%和74%,与牛、人和鼠的氨基酸序列同源性分别为97%、76%和74%。实时荧光定量PCR分析结果表明:奶山羊GPR41基因在小肠组织中表达量最高,其次是乳腺组织,在心脏和肾脏中表达量极低。试验结果表明GPR41可能在小肠和乳腺组织中发挥着重要的生理作用。

摘要：提出了一种适用于偏心轮腿六足机器人的直行四足步态规划.以一个运动周期为例,分析了偏心轮腿六足机器人直行过程中5个阶段的运动状态,以及每个运动状态中偏心轮腿步态的参数变化并用状态矩阵加以描述.将该步态用于所设计的偏心轮腿六足机器人,在驱动电机的控制下,能保证机器人的直行前进.

摘要：为评价低密度聚乙烯(LDPE)和高密度聚乙烯(HDPE)改性沥青耐短期老化性能,制备不同LDPE和HDPE掺量的改性沥青,通过旋转黏度试验、动态剪切流变试验和多应力蠕变恢复试验分析老化前及旋转薄膜烘箱(RTFOT)老化后流变性能。结果表明:老化前后LDPE掺量4%~6%或HDPE掺量2%~4%时,改性沥青135℃黏度均满足要求;不同改性沥青车辙因子老化指数为2.2~3.2,LDPE改性沥青不同温度下相位角老化指数均值约为1.7~2.8,HDPE改性沥青老化前后相位角变化不显著。两种改性沥青老化后不可恢复蠕变柔量提高,蠕变恢复率降低,变化幅度约为20%~38%;HDPE改性沥青老化后变化幅度比LDPE改性沥青低约10%~15%。除LDPE掺量4%的改性沥青外,其余改性沥青老化前后PG(performance grade)分级和基于多应力蠕变恢复的性能等级不变。两种改性沥青均具有较好的耐短期老化性能,HDPE改性沥青略优于LDPE改性沥青。

摘要：孩子天生就是艺术家,在他们的眼里,宇宙万事万物都是有生命有感情的,他们的创造植根于这种自然的生活力量之中。这种创造对他们来说就像呼吸一样自然自由,是自发的、直接的、感性的感知和体验。下面让我们一起走进他们的世界,欣赏这充满幻想、充满活力、充满自由的作品吧!