摘要：目的克隆表达屋尘螨过敏原Derp 4重组蛋白,鉴定其免疫原性并对其生物信息学进行分析。方法根据已知Derp4基因序列,设计PCR引物,提取屋尘螨总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增Derp4基因。将测序正确的基因片段克隆至pET-28a(+)载体,提取质粒测序鉴定,将重组质粒转入Rosetta2(DE3)pLysS感受态细胞,1 mmol/LIPTG诱导表达后,采用12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况。亲和层析法纯化重组蛋白后,以屋尘螨过敏患者血清为一抗,蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫原性。以纯化后的重组蛋白为包被抗原,间接ELISA法检测30份尘螨过敏患者血清IgE,鉴定其特异性。利用ProtParam tools、SignalP5.0、NetPhos3.1、CD-search、Alphafold、Immune Epitope Database and Analysis Resource(IEDB)等软件和生物信息学预测抗原肽(BPAP)系统等对Derp 4的理化性质、信号肽序列、磷酸化位点、二级和三级结构及B细胞抗原表位进行生物信息学分析。结果RT-PCR扩增出长度为1090 bp的条带。重组质粒测序结果显示,插入的片段为全长1090 bp的Derp 4基因序列。SDS-PAGE分析结果显示,Derp 4重组蛋白为包涵体蛋白,相对分子质量(Mr)约60000,经纯化后的重组蛋白纯度>90%。Western blotting分析结果显示,Derp 4重组蛋白可与尘螨过敏患者血清中的IgE特异性结合,在Mr60000处有明显条带。间接ELISA检测结果显示,Der p 4重组蛋白与14份(46.67%)尘螨过敏患者血清呈特异性IgE结合。生物信息学分析显示,Der p 4蛋白稳定性较高,无信号肽结构,二级结构和三级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主;IEDB和BPAP系统预测到Derp4蛋白存在15个B细胞抗原表位肽序列。结论纯化的Der p 4重组蛋白具有免疫原性,与屋尘螨过敏患者血清中的IgE抗体结合较好。

摘要：目的 建立一种能快速、准确检测环境中屋尘螨过敏原Der p 1基因的逆转录环介导等温扩增可视化(RT-LAMP)技术。方法 用Primer Explore 4.0对Der p 1基因进行RT-LAMP引物设计与筛选,提取屋尘螨、粉尘螨、热带无爪螨、腐食酪螨总RNA,利用优化的RT-LAMP反应体系分别扩增4个螨种的Der p 1基因,评价方法的特异度和灵敏度。采集74份哮喘患儿的床尘样品,提取总RNA进行Der p 1基因RT-PCR和RT-LAMP检测。结果 利用优化的RT-LAMP方法检测4种螨的Der p 1基因,只有屋尘螨阳性,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物呈现特征性梯形条带,肉眼和紫外灯下均观察到绿色荧光。建立的RT-LAMP对Der p 1基因的最小检测量为1.0×10^(-6 )μg,敏感性比常规RT-PCR高10倍;检测74份床尘样品,阳性率85.1%,与RT-PCR阳性率70.3%比较差异具有统计学意义(χ^(2)=4.72,P<0.05)。结论 建立的屋尘螨过敏原Der p 1基因RT-LAMP较常规RT-PCR灵敏度和特异性更高,可用于屋尘螨过敏原污染的快速检测。

摘要：转变观念是取胜之道。过去，由于历史的原因．《大河理财》特刊以登载广告为主，报道内容为辅。除了必发的广告，配发赠送软文是必须的，其他的“自留地”有多少．之前很难知道，等知道了，再筹划就来不及了。改革应从否定自己开始，策划报道是解决问题的好办法。新、奇、显是永远的追求新——形式新。根据需要，我们有时也会“形式大于内容”。一般服务性的稿子都不太讲究形式，其实形式的选择是很讲究的，形式选得好，有助于内容的表达；形式选得不好，有时好内容也不一定能表达到位。

摘要：《大河报·大河卖场》（以下简称《大河卖场》）创刊之初就是“广告卖场”，由于独领风骚，像一阵旋风掠过中原大地，引起不同凡响。8年过去了，它依然长盛不衰。傲视群雄，自有其内在的原因。但时间在变，环境在变，人的口味也在变。消费习惯的改变迫使我们要主动应对。应对的原则是：不改《大河卖场》的“卖场本性”，增加其“非卖场特性”，在不断探索中阔步前进。

摘要：构建特色鲜明的人才培养模式是高职教学改革的重点。本文结合教学实践,对三门峡职业技术学院的"岗位主导式"和"项目带动式"特色人才培养模式的实质、课程体系的建构,"岗位主导(证书引领)、项目带动"课程结构的改革,以及教学项目的设计与实施等几个人才培养模式的关键问题进行了一些思考和探讨。

摘要：金融危机来袭，直接使创办于2007年的《大河报》“大河金融理财”面临困境：银行、保险这些主要客源明确表示在广告投放上会“小手小脚”。送上门的广告越来越少，长期合同越来越少。既有的办法不行了，怎么办：走出去，改被动为主动；改做广告为做活动，通过活动带动广告，带动经营。

摘要：通过对校园网安全存在的威胁的分析,针对校园网络安全问题,提出了一套有效的主动防御安全模型.并从技术层面论述了该模型涉及的关键技术,并对校园网络安全建设作进一步探讨.

摘要：临床基础检验课程是一门实践性很强的课程,通过项目化教学并以案例为驱动,学生通过案例讨论,设计检验项目,实施项目,并进行汇报,教师全程引导,最后总结。结果显示学生在案例的驱动下,提高了学生对项目的设计和实施的积极性,增强了对理论知识的理解,提高实践动手能力。

摘要：目的:观察小分子干扰RNA(siRNA)沉默CD147基因在胃癌细胞株SGC7910中的表达,并探讨CD147基因对胃癌细胞生长、凋亡的影响。方法:根据CD147 cDNA序列设计具有短发夹结构的两条DNA序列,与载体pSilencerTM 4.1-CMV neo构建重组表达载体,鉴定后转染至SGC7910细胞,western blotting检测抑制效果,MTT检测细胞增殖情况,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:成功构建了针对CD147基因表达的干扰质粒,有效抑制了SGC7910细胞增殖,促进了SGC7910细胞凋亡。结论:CD147靶向RNA干扰重组表达载体为肝癌的基因治疗提供了可能。

摘要：探讨医学检验技术专业实施现代学徒制教学设计及实施效果。方法:选择医学检验技术中医学临床检验仪器课程实施现代学徒制教学,对我校2014级检验技术专业两个平行班,1班实施学徒制教学,2班实施传统的讲授式教学,并对学徒制教学方案的实施效果进行分析。结果:实验组期末成绩优于对照组。能更好地理解掌握知识(P<0.05),理论联系实际的能力也更高(P<0.05)。结论:现代学徒制教学的实施对医学检验技术专业课程的学习具有促进作用。