摘要：随着经济社会的发展,图书馆从一般的服务性职业发展到具有服务性质的行业,再发展到具有产业性质的行业,具有知识经济功能、文化产业功能和产业经济软实力功能等产业功能特征。图书馆与文化产业发展具有支撑耦合机理、互动耦合机理和融合耦合机理。支撑耦合机理包括文化功能支撑、文化产业项目支撑、文化创意支撑、文化产品促销支撑;互动耦合机理包括创意互动、生产互动、传播互动、消费互动;融合耦合机理包括内容融合、产品融合、链条融合、业态融合。

摘要：目的　探讨HIV 1gp4 1抗原表位串联表达蛋白用于HIV抗体检测的可行性。方法用HIV 1gp4 1蛋白亲和层析柱制备HIV 1感染者血清中的多克隆抗体 ,用噬菌体展示随机十二肽库进行生物淘洗 ,反向吸附非特异性噬菌体。经ELISA鉴定阳性克隆 ,DNA测序 ,确定优势表位。将优势表位与文献报道的另一个优势表位串联 ,克隆入pQE30载体进行蛋白表达。结果　成功筛选到位于HIV 1gp4 1蛋白上的优势抗原表位 (YGPKDAETTAIW ) ,串联表位 (YGPKDAETTAIW GGGS SC SAKFTCTTQI)在pQE30载体中实现可溶性表达。重组蛋白具有良好的抗原性 ,能与不同的HIV 1抗体阳性血清呈特异反应。结论　HIV 1gp4 1抗原表位串联表达设计是可行的 ,串联表位重组蛋白可用于HIV 1抗体检测 ,但检测灵敏性低于常规方法。

摘要：目的分析我国HIV-1主要亚型毒株的gp120区域的序列特征，并表达出gp120糖基化蛋白，为研究gp120的致病机制和设计疫苗奠定基础。方法利用巢式PCR从来自于不同省份的5名HIV-1感染者外周血单个核细胞DNA中扩增全长gp120基因并测序，对序列特征进行分析，并将获得的gp120基因克隆入真核表达载体，体外表达获得gp120糖基化蛋白。结果序列分析显示，此5条gp120序列分属HIV-1 Thai-B、BC重组和AE重组亚型，虽然亚型不同，但这些gp120序列在相同的位置都存在着一些保守的糖基化位点，且都具备相同的Furin蛋白酶第一切割位点，与参考序列比较发现，不同的HIV亚型序列中，除V3序列长度较为保守外，V1、V2、V4、V5各区域都有不同程度的缺失现象，与BC重组和AE重组亚型相比，Thai-B亚型V3的顶端环呈现出多种组合。最终将这5条gp120序列都克隆入真核表达载体并表达出糖基化的gp120蛋白。结论在设计疫苗和检测试剂时应考虑到膜区的高变性，gp120糖蛋白的体外表达有利于进一步开展针对我国主要HIV流行毒株膜蛋白致病机制和疫苗学的研究。

摘要：人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,简称HIV)是导致艾滋病的病原体。研究HIV的病原学是认识HIV的致病机理、寻找有效的抗病毒治疗的靶位、设计HIV疫苗和诊断方法并最终控制艾滋病的基础。自从1983年HIV被分离出以来,HIV的病原学研究取得了长足进展:阐明了HIV的形态、结构以及病毒各个组成部分的功能;了解了HIV的复制和生命周期,并对病毒复制的调控有了基本的认识;对HIV在体内的动态和变异规律有了深入的了解;在上述认识的基础上,对HIV的致病机理以及病毒与宿主细胞的相互作用进行了深入的研究并取得了良好的进展。但是,艾滋病的抗病毒治疗和特异性免疫预防还远没有解决。开展深入的艾滋病病原学和致病机理研究,进一步揭示病毒复制、调控和致病的分子机制,阐明病毒与宿主细胞的相互作用,是发展新型抗药物、设计有效的HIV疫苗的前提和保证。本文概括了HIV病原学研究领域的主要进展,并提出了今后研究的展望。

摘要：设计了一种新的病原体蛋白质B细胞抗原表位的筛选和重组表达方法。不须使用抗原 ,而通过交替用病人血清IgG抗体“淘洗”(biopanning)随机肽库和用正常人血清IgG反向吸附 ,来获得特异抗原表位资料。用HIV病人血清的IgG抗体淘洗噬菌体递呈随机十二肽库 ,再以正常人IgG抗体吸附 ,筛选到了能和HIV病人血清发生特异反应的噬菌体克隆 ,经ELISA、DNA测序等 ,成功地筛选出了位于HIVgp41外膜蛋白、高亲和力、构型特异的优势B细胞抗原表位 ( 60 2 GCSGKLICTTNV61 3)。用大肠杆菌硫氧还蛋白作为骨架 ,在其活性部位以“内融合”形式重组表达了该抗原表位 ,纯化的重组蛋白具有良好的抗原性 ,能与HIV( + )IgG抗体及艾滋病人血清呈特异反应 ,表明本技术路线可以有效地进行HIV蛋白质的B细胞抗原表位筛选和重组表达。此方法也可移植于其它病原微生物抗原或自身抗原的表位研究 ,继而为基于抗原表位水平的特异诊断试剂的研制、疫苗的设计提供依据。

摘要：目的　克隆、鉴定自河南省分离的HIV 1B Thai亚型流行株并进行系统发育分析。方法收集河南省 1份HIV 1感染者全血后分离的淋巴细胞 ,在植物血凝素存在下与健康献血员淋巴细胞共培养 ,从培养的淋巴细胞中提取前病毒DNA。在HIV 1基因的长末端重复序列的保守区设计引物 ,利用LATag长链扩增系统扩增HIV 1全长基因 ,纯化的PCR产物与pWSK2 9 T载体连接 ,成功克隆CNHN 2 4株。对鉴定的 3个克隆进行全长测序 ,利用局部同源法计算同源率 ,同时采用Phylip软件绘制HIV 1Env、Gag和Pol基因的进化树。结果　V3V4环序列分析表明 :本次克隆的CNHN 2 4株病毒为HIV 1B Thai亚型 ,V3环区氨基酸序列比对发现在 9个位点发生氨基酸替换。在含有 90 10bp ,全长HIV 1基因的CNHN 2 4株克隆中未发现明显的缺失、插入和重排现象 ,Gag、Pol、Vpr和Vif基因与RL 4 2株的同源率达到 95 4 2 %～ 97 0 8% ,进化分析显示 ,CNHN 2 4株与RL 4 2株的遗传距离最近。结论　HIV 1CNHN 2 4株为国内实验室完成的HIV 1全长基因克隆 ,为进一步研究HIV 1流行特征提供了基础。

摘要：目的研究人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)B'亚型vif基因的变异特征,探讨其与HIV传播和致病性之间的关系。方法采集河南省部分HIV感染者的外周血,提取41例HIV感染者外周血淋巴细胞DNA,设计特异性引物扩增其前病毒基因组中的vif基因,对于扩增阳性的29例PCR产物进行vif区基因的测序及分析。结果29条vif基因的平均离散率是0．0328,突变主要集中于90～120、270 -302、372～405、450～470四个区域。Vif多肽链的90～93位和157～160位存在两个富含R和K带有强烈正电荷的亲水区,带正电荷的R或K交替出现,几乎没有其他的氨基酸残基。29个Vif多肽链有21条在90～93位存在R90 RKR93基序;有26条在157-160位存在K157 RRK160基序,29条序列在114位和133位存在两个在HIV-1和HIV-2以及SIV内保守的半胱氨酸(A)。结论vif在HIV-1基因组内具有相对保守性,其特征性区域和氨基酸基序对于保持Vif蛋白的功能是十分重要的。

摘要：电视转播车作为电视节目制作的一种必不可少的工具,已经成为我国许多大中型电视台制作实力的一个重要标志,随着我国广播电视事业的飞速发展,一些地市级电视台也陆续购置了自己的转播车,来满足节目制作的需要.2000年底,局、台领导下决心,自筹资金千万余元,购置了一辆数字转播车.其设计思想是:花钱少、技术先进、符合实际需要,使有限的资金发挥出最大的作用,收到较理想的社会效益.

摘要：目的建立检测微量HIV-1 K103N耐药突变的等位基因特异扩增实时定量PCR（allele-specific real-time PCR，ASPCR）方法，用于微量K103N耐药突变的检测和分析。方法首先建立检测K103N耐药突变的ASPCR方法，然后对方法进行验证，最后采用ASPCR方法检测对照样本。构建含K103N突变的质粒作为标准品，然后设计特异性引物用以区分野生型和突变型模板，采用SYBRgreen法进行实时定量PCR，并绘制标准曲线。分别采用特异性和非特异性引物扩增模板，根据二者Ct（cycle threshold）值结合相应的标准曲线判断是否存在K103N突变及突变比例。对ASPCR检测K103N突变位点的特异性、敏感性、准确性、重复性等进行验证。结果特异性和非特异性引物扩增等量野生型模板的Ct值之差（△Ct）可达13．56；当突变比例小于0．1％时仍具有良好的准确性；批内变异系数小于0．7，批间变异系数小于1．6；检测灵敏度可达0．01％。检测阴性对照样本的△Ct显著高于临界值，阳性对照样本检测结果均为阳性。结论ASPCR是一种快速、灵敏、准确的检测HIV-1微量耐药突变的方法，可为临床抗病毒治疗提供理论指导。

摘要：目的：对一株从中国河南省一名艾滋病患者体内分离的、可在MT4细胞上稳定传代的未知病毒29A进行鉴定，确定该病毒种类及型别。方法：用从该患者外周血单核细胞中分离的病毒株感染MT4细胞，获得可在该细胞上稳定传代的病毒株29A。通过细胞病变特征、电镜观察结果、HIV-1 p24抗原检测以及HIV-1 pol区基因扩增结果，对该毒株是否为HIV-1进行鉴别。在电镜下对病毒感染细胞的超薄切片进行观察，发现该病毒呈现疱疹病毒形态特征，因此设计人类疱疹病毒6型（HHV-6）U69、U16／U17、U60／U66三个不同基因片段的特异性引物并进行巢式PCR扩增，对扩增产物进行序列测定和结果分析。结果：该毒株HIV-1 p24抗原检测为阴性；用HIV-1 pol区特异性引物未扩增出目的片段；细胞病变形态不同于HIV-1引起的病变；电镜观察该病毒直径为160～200nm，明显大于HIV—1，表明该传代株不是HIV-1。用人类疱疹病毒6型（HHV-6）U69、U16／U17、U60／U66等基因的特异性引物均扩增出了目的片段，序列分析的结果表明该毒株为HHV-6病毒B亚型。结论：在国内首次从艾滋病患者的外周血淋巴细胞中分离出HHV-6，为进一步研究HHV-6和HIV-1的相互作用奠定了基础。