摘要：目的构建卷曲蛋白跨膜受体7（FZD7）基因启动子，并分析其肝癌特异性转录调控活性。方法构建FZD7启动子及FZD7启动子变异体（MutFZD7），并设计合成荧光报告载体pFZD7-绿色荧光蛋白（GFP）、MutpFZD7-GFP。将各重组质粒载体转染至肝癌细胞HepG2、SMMC7721及正常肝细胞1．02中，用荧光显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达。在裸鼠肝癌移植瘤模型瘤体内注射各重组质粒后，制备肿瘤组织冰冻切片并在荧光显微镜下观察GFP表达。结果转染pFZD7-GFP的肝癌细胞HepG2和SMMC7721中均有高强度荧光，且GFP表达率分别为（45．1±3．1）％和（25．3±2．5）％，显著高于L02细胞的GFP表达率[（0．4±0．3）％，P〈0．05]；而转染MutpFZD7-GFP的HepG2、SMMC7721和L02细胞中荧光强度明显较弱，且GFP表达率分别为（21．5±2．7）％、（12．3±2．1）％和（0．2±0．1）％，均显著低于转染pFZD7-GFP的各对应组（P〈0．05）；对照组中，转染对照质粒pFZD7-Luc的肝癌细胞及L02细胞中未检测到GFP的表达，而转染对照质粒pEGFP-N1的各细胞株中均有大量细胞表达GFP。在裸鼠肝癌移植瘤中有相似的结果。结论FZD7启动子具有高度的肝癌特异性活性，T细胞因子／淋巴增强因子（TCF／LEF）转录因子结合位点在其转录调控中发挥关键作用。

摘要：目的采用基因工程技术构建风疹病毒复合多表位肽,探讨其对风疹病毒感染的血清学诊断价值。方法根据风疹病毒主要抗原分子E1、E2,设计并构建风疹病毒复合多表位肽的重组表达载体,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,并用Ni2+螯合柱亲和纯化获得复合多表位肽;经western blot鉴定其对风疹病毒感染后的Ig M阳性血清的免疫反应性;建立基于风疹病毒复合多表位肽的Ig M-ELISA检测方法,用于风疹病毒感染患者中血清Ig M抗体的检测。结果成功构建风疹病毒复合多表位肽,在大肠埃希菌Rosetta中获得了高效表达;纯化后的风疹病毒复合多表位肽经western blot分析显示,复合多表位肽对风疹病毒Ig M阳性血清具有较好的免疫反应性;Ig M-ELISA法检测结果表明,重组的复合多表位肽能够检测出风疹病毒感染后Ig M阳性血清,与Ig M阴性血清不发生反应。结论制备的风疹病毒复合多表位肽具有良好的抗原性,可用于风疹病毒感染患者Ig M抗体的检测,提高风疹病毒感染的诊断效能。