摘要：目的研究日本血吸虫表膜蛋白23kDa的DNA疫苗及其诱导小鼠的保护性免疫作用。方法以已克隆的质粒pBluescript－Sj23为模板，设计2条引物，经PCR扩增的Sj23基因克隆于真核表达载体pCD中，重组质粒定位注入小鼠骨骼肌，共注射2次，间隔时间9d，第14d处死小鼠，取定位处肌组织，荧光标记检测抗体，证实肌细胞可表达抗原Sj23。大量提取亚克隆后的质粒pCD－Sj23。把雄性BALB／C小鼠分2组，实验组用剂量为100μg／只的质粒DNA（pCD－Sj23）于第1、4、6周免疫接种，第8周2组均以正常尾锄40±2条／只攻击感染，第14周剖杀小鼠。结果与对照组比较，实验组成虫减虫率、减卵率、每条雌虫减卵率分别为33．01％，49．59％，15．70％。结论Sj23有可能成为有价值的候选疫苗，DNA疫苗可作为一种免疫新途径加以研究。

摘要：目的　构建日本血吸虫多价 DNA疫苗。　方法　在本室已构建的克隆载体 p Bluescript- Sj2 6、p Bluescript- Sj32及 p Bluescript- Sj2 3的基础上 ,根据 Sj2 6 k Da、Sj32 k Da和 Sj2 3k Da基因序列分别设计一对引物 ,且在引物中引入 1个含多肽接头甘氨酸 -甘氨酸 -丝氨酸 (G- G- S)的碱基序列。首先将 Sj2 3基因连接入载体 p BK中 ,构建重组质粒 p BK - Sj2 3,然后将 Sj2 6 k Da或 32 k Da基因分别连接入载体 p BK- Sj2 3中 ,构建成多价 DNA疫苗p BK- Sj2 6 - Sj2 3和 p BK- Sj32 - Sj2 3。对重组基因鉴定后 ,检测了质粒在小鼠肌肉中的表达情况。　结果　多价 DNA疫苗 p BK- Sj2 6 - Sj2 3和 p BK- Sj32 - Sj2 3转入了完整的 Sj2 6、Sj2 3和 Sj32基因。多价基因质粒能在小鼠肌肉组织中表达。结论　构建了日本血吸虫多价 DNA疫苗。

摘要：在已克隆的质粒pBluescript-Sj23基础上，设计二条引物。小量提取质粒pBluescript－Sj23进行PCR扩增，经扩增的Sj23亚克隆于真核表达载体pCD中，重组质粒转化***1。大量提取质粒pCD－Sj23，以剂量100μg／只给昆明小白鼠定位肌肉注射质粒pCD-Sj23，共注射2次，间隔时间为9天，每次注射前一天用0．5％盐酸布比卡因50μl／只预处理，第14天拉颈处死小鼠，定位处肌肉作冰冻切片，荧光标记抗体检测pCD-Sj23，见肌细胞胞浆及胞膜上有其抗原表达。

摘要：根据已报道的２３ＫＤａ基因序列，设计了２个寡核苷酸引物，应用聚合酶链反应技术，将提取的日本血吸虫成虫的总ＲＮＡ逆转录成ｃＤＮＡ进行扩增（ＲＴ－ＰＣＲ）。扩增的基因克隆到质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中，重组质粒转化Ｅ．ｃｏｌｉＴＧ１，在ＬＢ（Ａｍｐ＋）平板上挑阳性克隆经酶切分析。

摘要：目的对日本血吸虫Sj23DNA进行缺失突变,构建Sj23DNA突变体疫苗,为寻求更佳免疫效果的疫苗奠定基础。方法利用重叠PCR技术将Sj23DNA上与ME491同源的部分碱基缺失,获得Sj23DNA的突变体,将其克隆入真核表达载体pcDNA3的多克隆位点上,构建重组质粒pcD-NA3-Sj23突变体,进行酶切和测序鉴定,并用CLUSTALX和primerpremier软件将测序的结果与Sj23DNA序列进行分析。结果序列分析显示pcDNA3-Sj23突变体缺失序列与原设计一致,双酶切pcDNA3-Sj23突变体获得预期大小的DNA片段。结论成功构建了缺失与ME491同源部分碱基的质粒pcDNA3-Sj23突变体。