摘要：本文介绍一种基于微波雷达和红外传感器的安全车门锁的构想、设计与实现的相关内容。安全车门锁的设计主要是为了解决由于人们的粗心而不正当的使用车门所造成的事故问题,通过微波雷达对周围物体进行测速测距分析及人体红外传感器作为微波雷达的补偿检测手段。该装置能够在危险发生前做出判断,并通过蜂鸣器的鸣叫声对车内人员进行提醒和采取强制控制车锁自锁的方式来保证人员的安全,从而避免因为“开车门”引起的交通事故。

摘要：针对用户在还书时因归还位置不准确而导致后续借书的用户难以根据图书借阅系统提示的位置信息找到目标书籍的问题,利用CCD扫描仪实现对图书实时位置的精确识别和定位,搭建基于Linux内核的人机交互系统,引导图书管理员快速定位到存放位置存在偏差的书籍,解决因书籍实际位置和图书借阅系统提示位置不匹配而导致借阅效率低下问题。

摘要：制备重组蛋白pET28a-LHRH-PTD-GFP,利用绿色荧光蛋白GFP,研究LHRH的介导和PTD蛋白的转膜作用。以重组质粒pET28a-PTD-GFP为模板,设计含有LHRH基因序列的PCR引物,经过PCR扩增后双酶切,克隆到原核表达载体p ET28(a)中,构建重组表达质粒pET28a-LHRH-PTD-GFP,并在大肠杆菌中诱导表达,纯化目的蛋白。通过GFP的荧光特性,检测LHRH介导的PTD蛋白的转膜作用。成功构建LHRH-PTD-GFP原核表达载体,融合蛋白相对分子质量约为30 k,纯化得到蛋白浓度为1.62 mg/m L的LHRH-PTD-GFP重组蛋白。荧光显微镜检测结果显示,He La细胞内显现明显的绿色荧光,证明LHRH介导的PTD蛋白具有很好的跨膜特性。该研究结果为下一步构建以LHRH为靶向,以PTD为转膜作用的肿瘤治疗药物提供了理论基础和技术支撑。

摘要：为了利用多分子伴侣表达载体在大肠埃希氏菌中融合表达人干扰素（IFNα）-2b，并进行IFNα-2b纯化工艺研究，试验采用人工设计并合成Smt3-IFN（x-2b克隆至自行构建的P32-TrxA载体中，将重组表达质粒P32-TrxA—Smt3-IFNα-2b转化至大肠埃希氏菌（***）BL21（DE3），经IPTG诱导表达、SDS—PAGE分析，在此基础上利用金属螯合层析、SUMO蛋白酶酶切、阴离子交换层析以及凝胶层析建立了IFNot-2b的纯化工艺。结果表明：重组质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确；融合蛋白分子质量约为40ku，主要以可溶形式表达，表达量占菌体总蛋白的30％以上；纯化的IFNα-2b分子质量约为17ku，蛋白纯度达到95％以上，利用细胞病变抑制法测得干扰素的效价为1．0×10^8IU／mg。说明成功在大肠埃希氏菌中表达并经过简易工艺纯化了重组蛋白IFNα-2b。

摘要：为了研究促黄体激素释放激素(LHRH)介导的TAT蛋白核心肽PTD的跨膜作用,测定目的蛋白的转导效率,试验以pET28a—PTD—GFP质粒为模板,设计含LHRH基因序列的特异性PER引物,经PCR扩增后双酶切,并克隆到原核表达载体pET28a中,构建重组质粒并在*** BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,超声破碎后进行硫酸铵梯度沉淀,取上清液用Phenyl—HP疏水层析柱和Q阴离子交换层析柱纯化,将纯化后的目的蛋白加到体外培养的HeLa细胞中,观察转导情况,分析目的蛋白浓度对转导效率的影响。结果表明:PER扩增得到目的基因LHRH—PTD-GFP,并成功构建出重组质粒pET28a—LHRH—PTD-GFP,在*** BL21(DE3)感受态细胞中成功诱导表达出目的蛋白,经Phenyl—HP疏水层析柱和Q阴离子交换层析柱成功纯化出目的蛋白,在荧光显微镜下HeLa细胞内显现明显的绿色荧光,经分析转导效率与目的蛋白浓度之间呈正相关,回归系数为0.096 6,决定系数(R^2)为0.937 8。说明LHRH介导的TAT蛋白核心肽PTD具有很好的跨膜特性,转导效率对目的蛋白浓度具有依赖性,在一定浓度范围内随着目的蛋白浓度的增加转导效率增大。

摘要：利用4×4不完全双列杂交设计对小麦株高进行配合力分析,结果表明,从矮生性来看一般配合力效应以J31最高;株高的广义遗传力和狭义遗传力分别达到79.14％,71.61％;株高与产量构成因素(小穗数、穗粒数及穗粒重)相关系数皆未达显著水平。

摘要：为制备犬流感病毒(H3N2) M1蛋白纯品,针对M1基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段,扩增产物克隆至表达载体pET-SUMO中并转化至宿主菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白,探索纯化工艺,制备目的蛋白,并用Western blot检测纯化的M1目的蛋白。通过PCR成功扩增出大小为771 bp的M1基因,成功构建p ET-SUMO-M1表达载体,表达的融合蛋白相对分子量为41 kD,主要以可溶形式表达,纯化后获得蛋白纯品,Western blot检测显示用M1蛋白(28 k D)免疫小鼠制备的多抗能与制备的蛋白纯品发生特异性反应,从而证明蛋白纯品为M1目的蛋白。试验制备出的M1蛋白纯品可为进一步制备通用型抗犬流感病毒抗体提供纯品抗原。

摘要：目的建立快速、灵敏检测沙门菌的免疫层析试纸方法。方法根据沙门菌的16S DNA序列设计引物进行PCR扩增,并根据PCR产物设计2种特异性探针(探针B和探针F),分别在其5'端和3'端标记Biotin和FAM。PCR产物与探针杂交后应用于免疫层析试纸条。当检测有沙门菌时试纸条会出现2条红线,当没有沙门菌会出现1条红线。对探针的浓度进行优化后,检测沙门菌以及其他7种细菌分析该方法的特异性,并检测不同浓度(107cfu/ml^101cfu/ml)的沙门菌,分析其灵敏度。结果探针的最优浓度为1μmol/L,检测除沙门菌外的其他7种细菌,结果均显示阴性,检测沙门菌的最低浓度为10~2cfu/ml。结论该实验方法的灵敏度高、特异性好,适用于检测沙门菌,有良好的应用性。

摘要：目的制备含有7种血清型肉毒毒素切割位点(SNAP25-VAMP)的特异性绿色荧光融合蛋白,在***中诱导表达,纯化后用于肉毒毒素活性测定。方法根据SNARE蛋白复合物中SNAPE25和VAMP基因序列及各血清型肉毒毒素(Bo NTs)的切割位点,设计合成含有SNAREs中突触小体(SNAP25)和突触小泡膜蛋白(VAMP)的Bam HⅠ-HIS6-SNAP62-Eco RⅠ-VAMP57C-TAA-HindⅢ(以下简称为SV)基因,连接至p ET-28a-GFP载体上,构建重组质粒p ET-28a-GFP-SV,转化感受态*** BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经DEAE阴离子交换层析、Cu2+金属螯合层析、Q阴离子交换层析3步纯化,BCA法测定纯化产物的蛋白浓度,ELISA法检测B型肉毒毒素轻链蛋白(Bo NT/BL)活性。结果构建的质粒p ET-28a-GFP-SV经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的GFP-SV融合蛋白相对分子量约40 000,主要以可溶形式存在,蛋白浓度为18.4μg/μl,纯度可达70%以上。利用该融合蛋白的荧光强弱变化可测定Bo NT/BL活性大小,同时也可测定其抗体中和活性大小。结论制备的含有SV的特异性绿色荧光融合蛋白在***中获得了高效表达,为后续各型肉毒毒素活性检测及抗体中和毒素活性检测奠定了基础。