摘要：为了降低啤酒大麦蛋白的含量,提高啤酒大麦品质,利用甘肃推广面积最大的品种甘啤4号为材料,克隆大麦醇溶蛋白基因保守区序列,构建RNAi表达载体。根据已知大麦醇溶蛋白基因保守序列设计一对特异性引物B2PF5′-CAACCATTTC-CACAGCAACCACCAT-3′,B2PR5′-GAAAGATAGAGTAGACGATTGCACG-3′,采用PCR技术从甘啤4号大麦基因组中获得了1个349bp片段(GP4)。依据载体pHANNIBAL和pART27的结构,分别将GP4按所对应酶切位点正反向插入,利用热激法转化。结果分析显示,克隆出的片段与GenBank(NCBI)中醇溶蛋白基因核苷酸序列同源性高达92%,所构建成的RNAi表达载体pART27-pHAN-GP4中含目标片段。

摘要：采用同源序列克隆方法，通过设计特异性引物从甘肃西和半夏叶片基因组DNA中克隆到1条1069bp的半夏凝集素基因pta，与以同科内植物的mRNA为模板扩增得到的凝集素基因序列的同源性很高，达到98％以上，功能区完整，具有1条信号肽和3个甘露糖结合区，GenBank登录号AY725425。用该基因替换pBI121载体的GUS基因，正向插入35S启动子之下，构建了植物表达载体pBI—pta。通过农杆菌介导法转化烟草，从20株Kan抗性植株中得到PCR检测阳性植株14株，证明pta已整合到烟草基因组中。对随机挑取的7株PCR阳性植株进行了抗蚜虫（Myzus persicae）筛选试验，结果表明：不同株系蚜口密度抑制率在22．5％～89．4％，平均蚜口密度抑制率56．2％。

摘要：非市场评估法是定量化评估环境外部成本的重要技术。该方法主要通过问卷询问公众愿意为环境品质的改善所支付的金额(WTP)或者对于环境品质的恶化所接受的补偿(WTA),从而推导环境物品的价值。由于问卷内容基于假想情景进行,因此,提高评估结果的有效性和可靠性一直是备受关注的问题。本文认为影响非市场评估有效性和可靠性的因素包括调查方式、问卷设计和个体偏好,并分析了提高有效性和可靠性的检验方法,提出了相关研究假设。

摘要：随着国内资本市场竞争加剧、市场形势瞬息万变,加之家族企业先天条件不足、相关外部环境的欠缺和扭曲,市场风险、财务风险、企业风险日益突出,因此上市的家族企业要想在激烈的市场中立足,必须建立一套全面科学的内部治理结构。文章从"国美控制权之争"事件出发,基于利益相关者视角,通过对上市家族企业利益相关者的行为进行有效的协调,从而保证企业战略的顺利执行并有效地维护各方的利益需求。

摘要：采用同源序列克隆方法,通过设计特异引物克隆甘肃西和半夏(Pinellia ternata)凝集素基因pta,其序列全长l069bp,编码区804bp,编码268个氨基酸残基,有3个典型的甘露糖结合位点,预测分子量和等电点分别为29.1kD和7.77,GenBank登录号AY725425。构建了35S启动子驱动的植物表达载体pBI-pta。建立了陇棉2号花粉管通道法遗传转化技术,获得5株卡那霉素抗性和PCR检测阳性植株,为建立棉花转基因方法和培育抗虫种质奠定了基础。

摘要：以兰州百合鳞片为外植体获得的小鳞芽为材料,利用响应面法的Box-Behnken设计方法,对百合组培芽增殖进行试验优化。结果从响应面法优化模型得出的芽增殖最佳培养基为MS+1.25 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,在此条件下,增殖系数达3.82。

摘要：病毒病是引起兰州百合产量下降、品种退化的主要原因,准确、高效的病毒检测技术在百合脱毒种球生产和推广应用中十分重要。根据CMV、LSV和LMoV病毒外壳蛋白基因序列设计引物,以百合18S rRNA为内参照,建立兰州百合病毒RT-PCR、二重RT-PCR检测体系。对兰州百合主栽区病毒病的抽样调查发现,CMV、LSV带毒率分别达到98%、100%,LMoV检出率在不同时期样品中存在较大差异。

摘要：为了给人参果病毒检验及抗病性研究提供支持,对人参果采用ELISA和RT-PCR两种检测方法对8份田间材料中的马铃薯M病毒(PVM)、番茄花叶病毒(ToMV)和烟草花叶病毒(TMV)进行检测,对比筛选病毒检测方法。结果表明,ELISA法检测PVM的阳性检出率为87.5%;ToMV为37.5%,疑似率为12.5%;TMV为37.5%。通过RT-PCR检测体系,从人参果样品中分别扩增出与试验设计大小相符的特异条带,PVM阳性检出率为100%,ToMV为50.0%,TMV为37.5%,检测灵敏性和准确性更高,检测结果符合率在87.5%以上。对扩增阳性产物进行凝胶回收测序,确定为目标条带。

摘要：中国作为茶文化的发源地,饮茶历史非常悠久,最远可追溯至几千年前。茶楼作为向世界传播茶文化的重要场所,在设计时不仅要融入相应的文化内涵,还应注重茶楼内环境的舒适性,使茶客能在适宜的环境中享受茶叶的魅力。本文将从茶楼的使用需求出发,结合茶楼建筑独有的文化底蕴,运用DeST模拟软件,探究更适用于茶楼的室内环境。