摘要：近年来,CRISPR定点编辑技术发展迅猛,在动物、植物和微生物中均得到广泛应用。其中,备受关注的脱靶现象也是研究的热点,迄今已取得了重要进展。该文介绍了脱靶现象的产生原理及体内和体外检测脱靶现象的方法,评价了通过改进sg RNA设计和优化CRISPR系统等来降低脱靶率的方法。在植物基因组定点编辑过程中,应适时检测脱靶现象,提高脱靶检测的精确度和准确度。

摘要：随着转基因技术的发展,出现了多种对基因组进行定点编辑的新技术。本文介绍了常用的植物基因组定点编辑技术的基本原理,特别对新近发展起来的CRISPR/Cas系统的原理、组成及各元件的作用等进行了综述,比较了CRISPR/Cas系统与ZFN、TALEN等常用定点编辑技术的异同。文中列举了利用CRISPR/Cas系统对几种单子叶和双子叶植物进行基因组定点编辑的案例,认为通过CRISPR/Cas系统对植物基因组进行定点编辑是可行的,特别是由于嵌合sg RNA的成功设计,使得应用CRISPR/Cas系统更加简单方便。研究人员正在努力降低CRISPR/Cas系统的毒性和脱靶率,拓宽该技术的应用空间。