摘要：设计一套包括扭力扳手、连接轴、联接板、锁紧机构、铲刀和芯棒的检测工具,能方便地实现对轴承防尘盖铆合紧度定向、定量检测。

摘要：针对目前制造型企业面临的激烈竞争以及健康持续发展压力等问题,阐述了合理化建议与现场改善对企业发展的重要意义。在构建现场改善组织机构的基础上,设计相应的现场改善管理流程,为现场改善管理工作的开展提供了规范。利用关联矩阵法构建现场改善案例定量评估模型,实现了对现场改善案例的客观、定量评价。

摘要：13位有影响力的儿童文学作家从课堂到共同的书架,完成了一个童话的移动。“梅家将系列丛书”的策划和出版,让我们听到了属于这支独特队伍的独一无二的故事。去年7月,我刚到新世纪出版社的时候,就听说社里有一个“梅家军”的选题。或许真的是缘分吧,正在我感叹这个选题的可贵和独特的时候,它居然转到了我的手里。现在童书市场,名家主编的书比比皆是。如果请梅子涵主编一套儿童文学书系,那并没什么特别的。

摘要：阐述了建立营收会计凭证稽核管理系统的背景及可行性，方案设计以及效量分析。

摘要：采用酶消化法分离鸡胚原始生殖细胞(PGCs),纯化后进行体外培养,传至5～6代时,通过对阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)免疫荧光标记、碱性磷酸酶检测等方法联合鉴定其基本生物学特性,同时以RT-PCR方法检测其特异基因的表达。结果表明:体外培养的PGCs维持未分化状态,碱性磷酸酶阳性、免疫荧光检测其特异标志物SSEA-1阳性。鸡胚PGCs表达减数分裂前标志基因Dazl、Nanog和GDF3,生殖细胞分化后期基因CVH,原始生殖细胞标志基因Blimp-1以及干细胞多能性相关基因Oct-4,不表达减数分裂启动基因Stra8。提示所获得的鸡胚PGCs,其生物学特性稳定,表达相关特异基因,为鸡胚PGCs的体外培养及鉴定提供理论依据。

摘要：本研究旨在通过构建重组质粒pEGFP-hTERT转染鸡胚胎干细胞(Chicken embryonic stem cells,cESCs),优化鸡胚胎干细胞培养体系,以期构建鸡胚胎干细胞株或细胞系。在获得hTERT基因后,构建重组质粒pEGFPhTERT,并利用FuGENE^(?)HD转染鸡成纤维细胞(DF-1),转染24 h后,荧光显微镜检测;再以80%BRL-CM(大鼠肝细胞条件培养基)与20%的ES基础培养液混合的条件培养基培养分离的cES:s,添加10μmol·L^(-1)维生素C,AKP染色以及相关表面抗原SSEA-1、SOX2和OCT4检测鉴定后,以G418筛选pEGFP-hTERT转染的cES:s,传代培养后荧光定量PCR检测相关干性基因的表达水平。结果表明:维生素C可以促进cESCs增殖,pEGFP—hTERT转染的DF-1细胞中可以检测到绿色荧光表达,pEGFP—hTERT转染的cESCs可持续传至10代以上,且仍保持未分化状态,干细胞表面特异性抗原检测呈阳性,且相关干性基因的表达水平差异不显著(P>0.05)。综上表明:pEGFP-hTERT转染的cESCs在80%BRL-CM结合外源因子的作用下,能够持续稳定传至10代且仍保持未分化状态,可应用于鸡胚胎干细胞的永生化和细胞系建立。

摘要：旨在探讨BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的作用机理。采用单层贴壁培养作为分化模式，分别采用10、20、30和40ng·mL-1 BMP4浓度诱导雄性鸡胚胎干细胞，通过形态学、荧光定量PCR和免疫细胞化学检测诱导效果。根据细胞形态变化和差异基因表达量变化，确定了BMP4的适宜诱导浓度为40ng·mL-1。在适宜浓度诱导过程中，诱导4d类胚体开始出现，6～8d类胚体逐渐增大，数量增多，10d部分类胚体开始散开，变为小的圆形细胞，12d在散开后的类胚体周围可观察到少量生殖样细胞，14d生殖样细胞数目增多，且呈聚团生长的趋势。诱导过程中相应基因表达量也发生变化：胚胎干细胞标记基因Nanog、Sox2表达量显著下降（P〈O．01），生殖细胞特异基因Stra8、Dazl、integrina6、c-kit表达量均呈显著上升趋势（P〈O．01）。BMP4可以引起生殖细胞相应基因的表达，促进雄性鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞方向分化，结果为雄性生殖细胞的体外诱导研究提供试验参考，为进一步研究雄性生殖细胞发生和调控机制提供理论基础。

摘要：目的了解清远市陶瓷企业流动工人心理健康现况,分析影响陶瓷企业流动工人心理健康的因素,为开展流动工人的心理健康教育和制定干预措施提供科学依据。方法采用多阶段分层整群抽样法,使用自行设计的基本情况调查表、症状自评量表(SCL-90)、社会支持量表(SSRS)、简易应对方式问卷(SCSQ)进行调查。结果回收有效问卷1 300份,有效回收率为96.30%。其中流动工人786人,对照人群为该地工人514人。流动工人的SCL-90自评总分、阳性项目数以及各因子均分(除躯体化外)均高于对照人群(P<0.01);多因素logistic回归分析结果显示,1天平均工作时间、工作需要倒晚班、吸烟、消极应对方式得分、积极应对方式得分和主观支持得分等6个因素是影响清远市陶瓷企业流动工人心理健康的主要因素。结论清远市陶瓷企业流动工人心理健康水平低于该地工人。相关部门可从这些影响流动工人心理健康的主要因素着手,促进流动工人心理健康水平的提高。

摘要：[目的]构建敲除Toll Like Receptor 4(TLR4)基因的Ha Ca T细胞株,为后续利用该细胞株进行过敏原性研究提供材料。[方法]利用CRISPR/Cas9系统,根据靶向原理设计并合成4条特异性识别TLR4基因的向导RNA(single-molecule guide RNAs,sgRNAs),构建p X459-sgRNAh TLR4重组质粒,并转入Ha Ca T中,用嘌呤霉素筛选出单克隆阳性细胞。测序确认突变位点,然后利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激对TLR4进行功能验证来进一步确认敲除效果。[结果]测序结果表明#26单克隆细胞株在靶点附近缺失1 bp,造成TLR4编码基因的移码突变,蛋白翻译提前终止。功能性验证结果表明,在LPS的刺激下,IL-8和CCL20的mRNA水平分别下降约85%和90%,且IL-8的蛋白分泌水平也显著性下调(87%)。[结论]成功构建了敲除TLR4的稳定细胞株,并且验证TLR4的功能缺损。