摘要：【目的】通过对柔嫩艾美耳球虫(***)Profilin基因进行原核表达和纯化,探明重组Profilin蛋白对鸡的免疫保护效果。【方法】设计合成Profilin基因特异性引物,提取***孢子化卵囊总RNA,反转录成cDNA,用PCR扩增获得Profilin基因后连接至pET-32a(+)载体构建重组质粒pET-32a(+)-Profilin,在IPTG诱导下进行表达并纯化。用重组Profilin蛋白免疫雏鸡,随后经口服感染柔嫩艾美耳球虫卵囊,测定和统计雏鸡存活率、平均增重、血便计数、每克粪便卵囊数、卵囊产量、盲肠病变,计算抗球虫指数,观察盲肠组织病理学变化并测定血清中IL-2、IL-10、TNF-α、sIgA的水平以评估重组Profilin蛋白的免疫保护效果。【结果】成功表达了重组Profilin蛋白,大小为39.1 kDa。免疫保护试验表明:Profilin重组蛋白组鸡只存活率、鸡只血便数和OPG相对于感染不免疫攻虫组显著减少(P0.05)。在攻虫后7 d,感染不免疫攻虫组血清中IL-2、TNF-α、IL-10以及sIgA水平相比于空白对照组均极显著升高(P<0.01),而重组蛋白免疫组血清中IL-2、TNF-α、IL-10以及sIgA水平极显著低于攻虫不免疫组(P<0.01)。【结论】柔嫩艾美耳球虫重组Profilin蛋白可减少感染雏鸡的增重损失和卵囊排出,引发雏鸡体内的细胞免疫和体液免疫,具有一定的免疫保护效果。