摘要：目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建MLH1基因敲除的微卫星不稳定鼠源性结肠癌细胞Mc38和鼠源性乳腺癌细胞4T1,为研究微卫星不稳定肿瘤在抗肿瘤免疫治疗过程中的作用机制提供细胞模型。方法:设计2条特异性靶向MLH1基因的SgRNA序列,构建lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体,经PCR、测序鉴定;将lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体分别和慢病毒包装骨架质粒pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞构建lentiCRISPRv2-SgRNA慢病毒载体;利用lentiCRISPRv2-SgRNA慢病毒载体分别感染Mc38、4T1细胞,经嘌呤霉素和96孔板流式分选筛选出阳性单克隆细胞后PCR、Western Blot和测序鉴定;MLH1-/-Mc38细胞、MLH1-/-4T1细胞连续培养约70 d,经荧光PCR-毛细管电泳进行微卫星状态检测,筛选MLH1基因敲除的微卫星不稳定Mc38、4T1细胞。结果:测序结果表明成功构建lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体;PCR、Western Blot和测序结果表明成功构建MLH1-/-Mc38细胞、MLH1-/-4T1细胞;荧光PCR-毛细管电泳结果表明成功构建MLH1基因敲除的微卫星不稳定Mc38、4T1细胞。结论:本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建MLH1基因敲除的微卫星不稳定鼠源性结肠癌细胞Mc38和鼠源性乳腺癌细胞4T1,为后续深入研究微卫星不稳定肿瘤在抗肿瘤免疫治疗过程中的作用机制奠定了基础。

摘要：望虞河大桥是通苏嘉甬高速铁路的关键控制工程之一,主桥为(60+105+340+105+60)m斜拉桥,采用无砟轨道,半漂浮体系。现有300 m级无砟轨道高速铁路斜拉桥主要有钢箱结合梁、钢箱混合结合梁、钢箱桁梁三种方案,望虞河大桥主梁拟采用钢箱混合结合梁方案,首先论述其总体设计方案,研究得到其合理拉索间距及钢混结合段位置,并提出一种波形钢腹板混合梁方案,进行了刚度、应力、动力特性及主要工程量四个方面的对比分析。研究结果表明,本桥拉索间距采用中跨12 m,边跨10.5 m较为经济,钢混结合段设置在中跨距桥塔第1根拉索和第2根拉索之间较优;波形钢腹板方案具有经济性好及整体刚度大的优点,但由于尚未在铁路斜拉桥中得到应用,还需进一步深入研究。

摘要：结合作者近几年来利用多媒体技术进行高等数学教学的体会,讨论了在多媒体条件下教学策略设计中存在的主要问题,并就如何解决这些问题提出了看法。

摘要：基于现场地质调查和室内试验得到的矿岩力学参数,根据工程地质特点和开采技术条件,运用数值模拟软件建立了开采数值模型,对矿体开采和充填进行了模拟分析,得到了每中段的应力和位移场的分布情况。结果表明,充填可以有效抑制围岩的应力和变形,提高围岩或矿柱的承载能力,起到了稳定采场的作用。

摘要：普通铅箱作为日常放射源贮存的防护设备存在监管信息滞后、防偷防盗功能薄弱和运输困难等问题,随着澳大利亚放射性危险物品丢失事件的发生,铅箱智能化的更迭迫在眉睫。本文针对在铅箱内增设放射性同位素辐射剂量率的实时监测、实时定位系统、运输轨迹跟踪和回溯、异常开箱报警等功能,使之前对放射性同位素实时监控的难题得到了全面的解决,对核技术利用单位、监管部门来说都是至关重要的,对放射性同位素的使用及监管都迈出了坚实的一步。

摘要：针对当前燃气热水器浪费冷水的问题,设计了一种新型节能燃气热水器循环系统。通过改变热水器管路的循环情况,可以循环使用水管中没有达到合适温度前的水,达到节约用水的同时节约能源的目的。该系统是在现有循环系统的基础上加装了一个三通球阀,从而可实现将排出的冷水再次注入自来水管道中重新利用,避免了水资源的浪费。本设计基于节约资源的理念,以实现对资源的充分利用,同时也降低了使用成本。

摘要：随着城市轨道交通的不断发展,网络化运营特征日益凸显。精准、实时地掌控路网列车内乘客数量和满载率成为提升运营效率、乘客服务水平和安全防范能力的关键。文章基于TOF和智能视频分析技术,提出了一种车厢乘客计数系统及装置的设计方法,针对地铁特定环境及业务需求,训练了一个目标检测算法和追踪算法模型并搭建了一个原型系统,经过实验室验证,准确率高达95%以上。后续,将借助11号线(冬奥支线)落地契机,进一步优化完善技术方案,为“智慧地铁”建设提供有力技术支撑。