摘要：目的构建携带livin基因短片段发卡RNA(livin shRNA)的慢病毒载体。方法针对已经筛选确定的干扰人livin基因的有效靶序列,设计、合成靶序列的寡聚脱氧核苷酸DNA序列(Oligo DNA),退火形成双链DNA,与经Hpa I和Xho I酶切后的携带U6启动子和绿色荧光蛋白的pGCL-GFP载体连接产生短片段发卡RNA慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。结果PCR鉴定与DNA测序证实合成的含livin shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。结论成功构建人livin shRNA慢病毒载体。

摘要：目的 基于流式荧光技术建立一种对流感病毒及其亚型进行快速检测的方法,并进行临床标本检测。方法 通过序列比对,设计简并引物及特异性探针,合成质粒,利用Luminex平台建立检测方法并进行430份临床标本的检测,检测结果与福建省疾病预防控制中心的检测结果进行比较。结果 建立了一种快速的流感病毒分型检测方法,可同时检测A、B、C3种流感病毒及亚型(H1-H16、N1-N9),耗时3.5 h,特异性好、灵敏度高,稳定性可行,430份临床标本检测结果与福建省疾病预防控制中心结果进行比较,显示高度的一致性。结论 利用流式荧光技术建立的流感病毒及亚型分型检测方法灵敏度、特异性、稳定性高。

摘要：目的探讨呼吸道感染致病菌16SrRNA基因V3、V6可变区在液态芯片系统的应用价值。方法通过GenBank公布的呼吸道感染致病菌16SrRNA基因序列，设计并合成探针及引物，建立液态芯片检测系统，检测福建省立医院收集的52例呼吸道感染痰标本抽提的DNA，与测序结果比对，分析其灵敏度和特异度。结果呼吸道感染致病菌16SrRNA基因V3、V6区均存在差异，应用液态芯片可在3．5h得到检测结果，铜绿假单胞菌16SrRNAV6探针，可检测浓度大于10^2／μl标本，检测灵敏度为100．0％，特异度为100．0％；金黄色葡萄球菌16SrRNAV3探针灵敏度为66．7％，特异度为98．0％；金黄色葡萄球菌16SrRNAV6探针灵敏度为0．0％。结论呼吸道感染致病菌16SrRNA基因V3、V6可变区差异可应用于病原学诊断，但不适合检测所有的呼吸道感染致病菌。