摘要：目的　建立HBV聚合酶基因变异株DNA检测技术 ,探讨变异株的变异规律及其临床意义。方法　采用限制性内切酶酶切位点引入法设计引物检测YIDD、YVDD ,内切酶分析 ,PAGE电泳法检测DMHD、LMLL、LMAQ基因变异。结果　应用SSPⅠ及ApaL内切酶可准确地检测出YIDD和YVDD。 2 3例HBVDNA阳性病例中 ,9例YMDD未变异 ,BstNⅠ切点保持着野生型序列与参考序列相同 ;6例YMDD未变异 ,BstNⅠ切点发生变异 ;2例YMDD未变异 ,LMLL变异、BstNⅠ切点消失 ,并伴随有YAAV 4个氧基酸发生变异 ;1例YMDD未变异 ,DMHD发生变异 ;2例YIDD变异株伴随LMAQ变异、BstNⅠ切点变异 ;另 1例YIDD变异株在 50 2位 544位伴随YQHG、YKHG和SNLY、SHLY变异 ;3例YIDD和 2例YVDD病例的BstNⅠ切点均有变异。结论　研究结果发现 ,在YMDD未变异株中 50 % ( 9/1 8)为野生株 ,50 % ( 9/1 8)有基因变异 ,提示LMAQ、YIDD、YVDD变异 (W 2～W 1 2 )

摘要：目的建立简便HBV基因型s基因PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）分型方法（以下简称“简便PCR—RFLP法”），并评价其临床应用价值。方法临床诊断研究。查阅并比较GenBank中128株HBV（基因型A～D型）S基因片段（s区nt253-687），设计限制性内切酶HinfI、EarI、ApoI鉴别A～D基因型分型方法，并评价简便PCR—RFLP法检测HBVDNA的最低检测下限、重复性；然后，用该方法检测50例慢性乙型重型肝炎患者的HBV基因型，同时用直接测序法验证简便PCR—RFLP法检测HBV基因型的一致性。结果建立了简便***法HBV基因分型的方案，通过限制性内切酶HinfI一次酶切就可分出我国流行的B型、C型、D型等毒株及B／C混合型。随机抽取3份标本，不同稀释浓度下，用简便PCR—RFLP法重复检测HBV基因型，分型结果均与原血清完全一致，且最低检测下限约为7～9IU／ml。经HinfI酶一步酶切后，用简便PCR—RFLP法从50例患者标本中，检出B型23份、c型10份；经直接测序法验证，从PCR产物中检出B型23份、c型10份，2种方法检测B、C型基因结果完全一致（Kappa=1．00，P=0．001），简便PCR—RFLP法检出B／C混合型9份，优于PCR产物直接测序法（0份，X2=18．00，P=0．001）。HinfI酶一步酶切后分出的ABD型8份，进一步酶切及应用PCR产物直接测序法检测均为B型变异株。结论建立的简便PCR—RFLP法对HBV基因分型有较高的灵敏度和重复性，且在检出混合基因型方面具有优势，更为简便。

摘要：目的：了解我国不同人群中庚型肝炎病毒（ＧＢＶＣ／ＨＧＶ）感染的状况。方法：以ＮＳ５区序列分析为基础设计引物，建立聚合酶链反应方法，并对我国几个地区、不同疾病状况的２６８例患者进行庚型肝炎病毒核酸的检测。结果：有输血史的健康人群、ＨＢＶ和ＨＣＶ感染者及慢性非乙非丙型肝炎患者的ＧＢＶＣ／ＨＧＶＲＮＡ阳性率均高于自然人群，分别为１３．３％，１８．４％，１９．８％，８．９％，其中有明确血液暴露史者的检出率达２０．１％。结论：庚型肝炎在我国有广泛的流行，输血等肠道外途径为重要危险因素。

摘要：目的建立敏感、特异的逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）方法，以检测中国人庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染。方法根据中国人感染ＨＧＶ者ＮＳ５区部分核苷酸序列分析结果，设计套式ＰＣＲ引物，用于ＨＧＶＲＮＡ的检测，并与用国外报道引物所作的一次ＰＣＲ和套式ＰＣＲ检测结果进行比较。结果共检测标本１３３份。以国外报道引物作一次ＰＣＲ和套式ＰＣＲ检出率分别为８．３％和１１．３％，作者建立的套式ＰＣＲ检出率为１８．０％，对部分ＰＣＲ产物进行序列分析证实为ＨＧＶ特异性基因。结论建立的方法可在中国人群中显著提高ＨＧＶＲＮＡ检出率。

摘要：为了进一步证实ＥＢ病毒与干燥综合征发病的关系，作者设计了ＥＢ病毒ＢａｍＷ片段特异的引物和寡核苷酸探针，利用ＰＣＲ体外基因扩增方法和核酸分子杂交技术检测出干燥综合征患者外周血白细胞及唇腺组织中存在有高频率的ＥＢ病毒ＤＮＡ，而对照组的阳性率相对很低。用原位杂交方法检测干燥综合征患者唇腺组织中ＥＢ病毒ＤＮＡ，共２８例中有１６例为阳性。结果说明干燥综合征患者ＥＢ病毒感染率较正常人明显增高，且ＥＢ病毒感染与靶器官的损害有关，提示靶器官控制ＥＢ病毒细胞内复制的免疫机制出现异常。