摘要：目的建立巴贝西虫数字PCR检测的有效方法,为后续巴贝西虫研究及我国血供安全评估提供技术方法储备和参考数据。方法从GenBank下载我国可感染人巴贝西虫的18S rRNA基因序列,并根据序列共同部分设计引物,建立基于巴贝西虫灵敏度高、可绝对定量的数字PCR检测方法;检测1000(人)份2016年7月19日~2016年8月24日牡丹江市采集的献血者红细胞标本。结果所建立的巴贝西虫数字PCR检测方法重复性良好,可稳定检测单拷贝数核算,应用于献血者标本数字PCR阳性检出率0.2%(2/1000),2例巴贝西虫感染者经间接免疫荧光检测(IFA)结果为阳性,初步判断为无症状感染。结论巴贝西虫数字PCR检测方法具有较高灵敏度和较好稳定性;若能应用于献血者巴贝西虫血液筛查,可减少这类无症状感染对血液安全的威胁。

摘要：目的建立一种筛查多种可感染人巴贝西虫（包括***,***,***,*** EU1,Babesia_sp._XXB/Hangzhou等）的实时荧光PCR检测方法;用实时荧光PCR和间接免疫荧光检测（IFA）2种方法分别对牡丹江市无偿献血者血样进行核酸和血清学检测,评估其对当地输血安全的风险。方法从Gen Bank下载我国可感染人巴贝西虫的18S r RNA基因序列,并根据序列共同部分设计引物,用引物验标准质粒并优化实验条件,建立实时荧光PCR检测方法。将1 971份无偿献血者的血液标本离心,使其分离成红细胞和血浆2个部分：1971份红细胞标本混样（10份/pool）,用已建立的实时荧光PCR进行核酸检测,阳性混样池再拆分检测;其中1 000份血浆标本用IFA法进行*** Ig G检测。结果经琼脂糖凝胶电泳和一代测序验证,标准质粒构建成功且实验条件已经优化,成功建立了实时荧光PCR检测方法,重复性良好,最低检测下限为9.69×102copies/m L;1 971份红细胞样本巴贝西虫核酸检测结果均为阴性;1 000份血浆样本*** Ig G血清学检测结果显示共13例阳性（阳性率1.3%）,其中8例（0.8%）滴度为1∶64,5例（0.5%）滴度为1∶128。结论本研究成功建立了一种筛查多种感染人巴贝西虫的实时荧光PCR核酸检测方法;标本检测结果显示牡丹江地区有既往***感染,提示巴贝西虫已经对该地区血液安全造成一定威胁,但风险大小有待进一步评估。