摘要：目的:提高汉坦病毒(HV)的检出率。方法:设计了两对新的汉坦病毒(HV)通用引物,建立新的RT-PCR方法,对流行于湖北省不同地区的肾综合征出血热(HFRS)患者血清进行了检测。结果:在对166份血清中HV RNA的检测显示HTN型阳性率为80.1%(133/166),SEO型为19.9%(33/166);对不同浓度的HV RNA检测结果显示,本法最低可检测出血清中72 pg病毒基因组。结论:说明本法用于检测HFRS患者血清中HV RNA的特异性和敏感性均很高,且我国中部地区HFRS流行以HTN为优势型,这一结果不仅为HFRS的诊断提供了新的手段,也为HFRS的防治提供了新的依据。

摘要：为了建立一种快速诊断呼吸道合胞病毒（RSV）感染的方法，根据RSVN基因的核苷酸序列，设计合成了一对引物，经RT-PCR扩增，可检出RSVRNA该引物不能检测流感病毒、副流感病毒RNA。应用该法可检出疑为RSV感染的婴幼儿鼻咽分泌物中的病毒RNA且比病毒分离法敏感，特异性与免疫荧光法一致。结果表明RT－PCR法具有快速、敏感、特异的优点，可用于RSV感染患儿的临床诊断。

摘要：目的:探讨苦瓜提取液体外抗柯萨奇病毒(CVB3)的作用及抗病毒作用的机制,从而为柯萨奇病毒感染的治疗提供新的手段。方法:根据病毒复制周期,设计2个药物抗病毒作用靶点,观察苦瓜提取液在不同靶点对柯萨奇病毒的作用。在H ep-2单层细胞上,通过观察细胞病变效应(CPE)、四甲基偶氮唑蓝(M TT)法检测细胞活性、病毒抑制率测定,以确定苦瓜提取液体外抗病毒活性。结果:苦瓜提取液对H ep-2细胞的半数毒性浓度(TC50)为1004.8μ***-1;苦瓜提取液抑制病毒组对柯萨奇病毒的抑制率随药物浓度的增加而增加,其半数抑制浓度(IC50)为35.4μ***-1,T I为7.82。苦瓜提取液直接灭活病毒组,各浓度组均出现典型CVB3所致的细胞病变,与病毒对照孔无显著区别。结论:苦瓜提取液可通过抑制病毒增殖发挥抗柯萨奇病毒作用。

摘要：参考汉坦病毒（ＨＶ）的基因文库软件设计Ｍ片段Ｇ－１区型特异性引物，以ＨＶ　７６／１１８、Ｈ－１１４、Ａ－９及Ｒ－｛２２｝株ＲＮＡ为阳性模板，建立ＨＶ的分型方法──逆转录一半巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ｈｅｍｉｎｅｓｔｅｄ　ＰＣＲ），对湖北省不同地区分离的３０株ＨＶ进行分　型。结果显示：（１）建立的ＲＴ－ｈｅｍｉｎｅｓｔｅｄ　ＰＣＲ分型方法对ＨＶ两型的代表株７６／１１８（ＨＴＮ）、Ａ－９（ＨＴＮ）、Ｈ－１１４（ＨＴＮ）及Ｒ－｛２２｝（ＳＥＯ）ＲＮＡ进行了特异性扩增，其大小与理论值一致；此　法只能检测ＨＶ　ＲＮＡ，不能检测其它病毒ＲＮＡ。（２）分离于湖北省不同地区的３０株ＨＶ的分型结果　为汉滩型２１株、汉城型９株，其中长江以南汉滩型１２株、汉城型２株；长江以北汉滩型９株、　汉城型７株。这表明建立的ＲＴ－ｈｅｍｉｎｅｓｔｅｄ　ＰＣＲ用于ＨＶ的检测特异性好；分析湖北省不同　地区分离的３０株ＨＶ，显示湖北省ＨＦＲＳ流行为混合疫区；且在湖北地区具有一定的地理聚集性。

摘要：目的建立C组轮状病毒VP6、VP7、VP4和NSP4基因全片段扩增方法;明确武汉地方株Wu82与其他毒株的系统发生关系。腹泻患者大便。方法PAGE筛查病毒;设计9对引物RT-PCR扩增VP6、VP7、VP4和NSP4基因;VP6、VP7序列及亲水位点分析。结果Wu82VP6和VP7基因核酸序列与其它人C组轮状病毒相比同源性分别为98.45%～97.12%和99.34%～94.83%。结论C组轮状病毒基因非常保守,进化缓慢。2001年武汉地方株Wu82与1995年武汉地方株208株相比,VP7和VP6抗原表位存在差异。

摘要：目的 :探讨中药大黄对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠的保护作用。方法 :利用BALB C小鼠感染CVB3后建立的病毒性心肌炎模型 ,采用正交设计确定治疗方案 ,通过观察小鼠的中位生存期、生存率、病理学检查评价大黄注射液对柯萨奇病毒B3感染小鼠的保护作用。结果 :经大黄注射液、病毒唑及 0 9%氯化钠治疗组的CVB3感染小鼠 ,中位生存期为 2 3、11、10 5d ,存活率为 35%、5%、5% ,大黄注射液治疗组小鼠组织病变程度减轻 ,病灶减少。结论

摘要：为建立扩增未知序列白蛉热病毒M片段的RT-PCR方法,本研究选取7个血清组成员和8个未分组血清型,共42株白蛉热病毒为RT-PCR检测对象。通过排列GenBank中已知的4型白蛉热病毒M片段氨基酸序列,选择保守区设计引物。根据保守区各已知病毒的cDNA特异序列合成寡核苷酸,将相同区的寡核苷酸等量混合成为“鸡尾酒”引物,用于RT-PCR。扩增产物经电泳检测,纯化后直接测序。引物对Ph-M-2FM和Ph-M-3RM扩增产物长度约为600bp,从42株病毒中扩增出34株,阳性率为81.0％。另一引物对Ph-M-2FM和Ph-M-4R2M扩增产物长度约为1400bp,扩增出22株病毒,阳性率为52.3％。测出序列经BLAST检索,与GenBank中已知白蛉热病毒同源。本研究首次成功地应用RT-PCR扩增不同血清型未知序列白蛉热病毒的部分M片段,并测出扩增产物序列,为白蛉热病毒属成员的基因鉴定和种系发生关系分析提供了实验手段,并将有助于白蛉热病毒感染的基因诊断。

摘要：目的 :研究空心莲子草类盐注射液治疗汉滩病毒 (HTNV)感染乳鼠的疗效。方法 :应用正交设计 ,选择空心莲子草类盐注射液剂量为 2 0 0mg·kg-1·d-1对感染HTNV 76 / 118株的乳鼠进行治疗 ,采用微量细胞培养结合直接免疫荧光法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测治疗后乳鼠不同组织中的病毒滴度和病毒核酸。结果 :空心莲子草类盐注射液能减轻乳鼠发病症状 ,降低死亡率 ,延长平均生存天数 ;乳鼠脑、心、肺、脾、肾等脏器中感染性病毒滴度下降 ;空心莲子草类盐能加快血液中HTNV76 / 118的清除。同时研究结果也显示空心莲子草类盐注射液抗HT NV 76 / 118株的作用类似病毒唑。结论 :空心莲子草类盐注射液在体内对HTNV感染乳鼠有治疗作用。

摘要：目的　对分离自湖北省不同地区的 30株汉坦病毒 (HV)RNAM片段进行分析 ,以了解湖北省不同地区HV的基因特征及基因组功能。方法　参考HV的基因文库软件设计M片段G1 区型特异性引物 ,用适合于湖北省HV分型的逆转录 -半巢式聚合酶链反应 (RT -heminestedPCR) ,并结合限制性内切酶酶切图谱分析 ,对湖北省不同地区分离的 30株HV进行分型、酶切。结果　分离于湖北省不同地区的 30株HV的分型结果为汉滩型 2 1株、汉城型 9株。 2 1株汉滩型靶基因被HinfⅠ、HaeⅢ消化的图形与标准株 76/ 1 1 8株的图形一致 ,未见与H - 1 1 4株相似的图形 ,其中武汉和洪湖各有l株靶基因HaeⅢ消化只见 1个片段 ;应城、江夏、黄陂和麻城各有 1株靶基因HinfⅠ消化有 3个片段。另外 2 1株汉滩型靶基因除前述的应城毒株外均被HincⅡ消化。 9株汉城型靶基因不能被HaeⅢ消化 ;HinfⅠ消化只见 2个片段 ,而EcoRⅠ消化却见 2个片段 ,与R2 2 株消化的图形不一致。结论　湖北省HFRS流行为混合疫区 ;汉城型M片段基因稳定 ,汉滩型M片段基因不稳定 ,且在湖北地区具有一定的地理聚族性。

摘要：目的:探讨湖北省不同年份引起肾综合征出血热的汉坦病毒的主要型别,为进一步研究该型汉坦病毒的基因变异打下基础。方法:根据汉坦病毒M基因片段G1编码区核苷酸序列设计Ⅰ型和Ⅱ型分型引物,利用RT-PCR时105份不同年份的病程在7日以内的肾综合征出血热(HFRS)患者(经临床诊断和ELISA确诊)血清标本进行检测及基因分型,并对扩增出的基因片段选用3种限制性内切酶Alu Ⅰ、Rsa Ⅰ、Mbo Ⅰ进行酶切分析。结果:用Ⅰ型引物通过RT-PCR检测75份血清标本(1996-2000年)和30份血清标本(1986-1987年)的阳性率分别为77.3％和10％,而用Ⅱ型引物检测前者阳性率为8.0％,后者均为阴性。对4份Ⅰ型引物扩增产物用3种限制性内切酶进行酶切分析,发现4份阳性产物其限制性片段长度多态性均与Ⅰ型汉坦病毒标准株76-118完全不同,但其中3份与Ⅰ型汉坦病毒湖北地方株HV114相同,1份与HV114不完全相同。结论:不同年份引起湖北地区HFRS的主要毒株均为Ⅰ型汉坦病毒(HTN)湖北地方株。