摘要：目的进一步阐明铁皮石斛(Dendrobium officinale)中木脂素生物合成的分子调控机制,克隆铁皮石斛木脂素合成关键酶基因DoPLR,分析其序列特征及表达模式。方法根据NCBI中铁皮石斛PLR基因序列设计特异引物,利用PCR技术克隆铁皮石斛DoPLR基因,利用生物信息学软件分析DoPLR基因及编码蛋白的结构特征。利用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测DoPLR基因在铁皮石斛不同组织部位、不同非生物胁迫、不同激素处理等情况下的表达模式。结果克隆获得铁皮石斛DoPLR基因,该基因的开放阅读框(ORF)长度为933bp,编码310个氨基酸,蛋白相对分子质量和等电点分别为36.4 KDa和6.54;该蛋白含有NAD(P)~+结合结构域,为亲水性蛋白,可能在细胞核中发挥作用,有29个磷酸化位点;该蛋白二级结构含有37.42%的α-螺旋、7.42%的β-折叠、36.77%的无规则卷曲和18.39%的延伸链;聚类分析表明该蛋白与亚麻LuPLR蛋白聚在一个分支上;互作蛋白分析表明丝氨酸苏氨酸蛋白激酶、转录因子bHLH63等蛋白可能与该蛋白发挥作用密切相关;qRT-PCR结果表明,DoPLR基因在不同组织部位、不同激素处理、不同非生物胁迫下的表达模式均存在差异,推测该基因可能参与铁皮石斛对非生物胁迫和激素的响应。结论克隆获得了铁皮石斛DoPLR基因,分析了其序列特征和表达模式,为深入研究DoPLR基因的功能和铁皮石斛木脂素生物合成分子机制奠定基础。

摘要：生化实验是一门相对独立的实验技术课,中医院校的生化实验课的设置有其特点,在中医院校中开设实验课首先要做好实验课备课及实验准备,熟悉教学内容,结合实际设计实验操作步骤.同时,实验课中要注意几个问题,注意培养学生实事求是的科学态度,教师的认真预试是保证实验质量的关键.在实验教学中,简要介绍理论知识,重点要放在实验操作上,同时要注重调动学生的主观能动性,启发学生思考问题,不断加入新的知识,丰富学生的视野.

摘要：实验课是医学院校开展教学活动和培养学生专业素质和创新精神的重要途径,是对学生理论水平和综合素质能力提升的一个重要手段。以酶的特征性常数Km值的测定实验设计为例,研究生物化学设计性实验教学模式的构成、内容选择和模式建立。通过实验构建了特定的教学开展形式,促进了教学改革和教学质量的提升。学生通过实验提高了学习积极性和分析问题、解决问题的能力,培养了学生的创新意识、创新精神和创新能力,在生化实验教学领域值得推广。

摘要：实验教学过程是培养创新型、实用型中医人才的重要环节。该文通过对实验室管理体制、教学模式、实验课程和实验项目设计改革的研究和探索，探讨提高学生基础实验操作技能、分析问题的能力以及培养学生的科研素质的途径和方法。