摘要：对转入多拷贝rolB、rolC基因的三倍体毛白杨进行高生长量、生根率和内源激素(IAA、ABA)含量等指标的测定,以研究多拷贝rol基因在转基因植物中的表达。结果显示:转Ri质粒三倍体毛白杨再次分别转入rolB、rolC基因后,部分株系试管苗的生长受到了抑制,但各株系生根率均有不同程度提高;rolB基因转化植株的内源IAA平均含量高于rolC基因转化植株,其IAA/ABA值亦高于rolC基因转化植株。试验结果表明rol基因的多拷贝促使转化植株快速大量生成毛状根。

摘要：【目的】探究转多基因欧美杨107杨中外源Bt基因是否稳定存在及表达,探索转基因107杨不同时间、不同部位Bt毒蛋白表达规律,研究多基因转化的载体结构及基因互作对外源基因表达稳定性和高效性的影响。【方法】选取1年生转Cry1Ac-Cry3A-NTHK1基因107杨3个株系(A1、A2、A3)和转Cry1Ac-Cry3A-BADH基因107杨3个株系(B1、B2、B3),通过PCR技术对转基因107杨中外源基因进行检测和验证,通过实时荧光定量PCR对Bt基因的转录丰度进行检测,利用ELISA技术对转基因107杨不同时间、不同部位毒蛋白含量进行检测。【结果】PCR检测结果显示,转基因107杨均能扩增出与阳性对照大小一致的特异性条带,阴性对照未扩增出特异性条带,证明外源基因在转基因107杨中稳定存在;实时荧光定量PCR检测结果表明,2种Bt基因在转基因107杨中均能稳定表达,Cry1Ac基因的转录丰度在2.1×10^4~5.1×10^4之间,Cry3A基因的转录丰度在2.8×10^6~5.6×10^7之间,Cry1Ac基因和Cry3A基因转录丰度无相关性;ELISA技术检测结果显示,转基因107杨中均检测到Cry1Ac和Cry3A毒蛋白存在。2种Bt基因转录丰度和毒蛋白含量无相关性,但2种Bt毒蛋白含量之间呈现出正相关关系。转2种不同载体的107杨6、7月份2种Bt毒蛋白的含量较低,8月份急剧上升,Cry1Ac毒蛋白的含量均在9月份达到峰值,Cry3A毒蛋白含量均在8月份达到峰值,10月急剧下降。8月份不同部位(上、中、下)的叶片Bt毒蛋白含量未表现出一致性规律,不同部位(上、中、下)木质部的Bt毒蛋白含量也未呈现出一致性规律。【结论】转Cry1Ac-Cry3A-NTHK1基因107杨和转Cry1Ac-Cry3A-BADH基因107杨不同株系间2种Bt基因的转录丰度存在显著差异,Cry3A基因的转录丰度显著高于Cry1Ac基因;2种Bt毒蛋白在各株系间存在显著差异,Cry1Ac毒蛋白含量极低,Cry3A毒蛋白含量极显著高于Cry1Ac,与转录水平检测结果一致。2种不同载体之间Cry1Ac基因转录丰度、毒蛋白表达模式及含量无明显差异,Cry3A基因转录丰度、毒蛋白表达模式及含量也无明显差异。在转基因107杨整个生长季中,Cry1Ac和Cry3A平均毒蛋白含量变化趋势基本一致,呈单峰模式。

摘要：如何使思想教育工作正确、科学、有效地进行,无疑是每一个思想教育工作者所共同关心的问题,文章拟通过对思想教育目标的分析,结合心理学、教育学原理对思想教育的心理艺术作一探讨。

摘要：如何使思想教育工作正确、科学、有效地进行,无疑是任何一个思想教育工作者所共同关心的问题,本文拟通过对当前思想教育目标的分析,结合心理学、教育学原理对思想教育的心理艺术作一探讨。

摘要：该文采用正交试验设计研究了741、303、易县毛白杨(对照)三个无性系硬枝扦插生根特性及其繁殖方法,考察了无性系、采条部位、药剂处理三个因素对窖藏催根效果的影响以及荫棚下塑料小拱棚内扦插与大田扦插两种繁殖方法对插穗生根及生长的影响。结果表明,741、303的硬枝插穗经药剂处理、窖藏催根后。可在大田直接扦插,而易县毛白杨适宜在塑料棚内扦插。

摘要：以20个白杨双杂交杂种新无性系为主要试验材料，研究了无性系叶片抗脱水能力，叶片渗透调节能力，水分胁迫下的生长和生理表现，并对无性系抗旱能力进行了综合评价。无性系间在各项指标间存在着显著差异，以苗高、单叶面积、净光合速率、蒸腾速率、叶片失水率和叶片渗透调节能力6项指标作为育种材料抗旱性筛选的综合鉴定指标，并尝试采用加权排序方法对无性系抗旱能力进行鉴定。综合抗旱能力最强的10个无性系为B432，B402，MXZ，B412，3，B435，B450，B430，B437，B406。

摘要：随着转基因技术的成熟,转基因生物越来越多,关于转基因生物的争议也越来越受到人们的关注。建立一套能够简便、快速、准确的检测转基因林木的外源基因技术,对转基因林木的研究有重要意义。采用灵敏、快速的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,建立一套以Bt Cry1Ac或Npt II基因为靶标的转基因林木的检测方法。针对靶标基因的6个区域设计4种特异引物,优化LAMP-PCR反应体系中的各个成分,根据直接观察产物中焦磷酸镁的沉淀情况、Gold View核酸染色剂对其产物染色情况来判断反应结果并与将产物经过1%琼脂糖电泳的情况进行对比。比较LAMP-PCR和常规PCR两种不同检测方法的灵敏度。对转基因杨树不同无性系中多种外源基因进行检测。筛选出了最佳的引物,确定出了最优的反应体系:3 mmol/L Mg2+、1.4 mmol/L Bst、1.4 mol/L Betaine、7:1的10μmol/L内外引物比、2μL10 mmol/L d NTP、以及2μL浓度为200 ng/μL的DNA模板。在PCR仪65℃等温条件下保温90 min,可直接观察到焦磷酸镁的白色沉淀;经过Gold View核酸染色剂染色,可在紫外灯下观察到荧光绿色;经过1%琼脂糖电泳的检测,可观察到清晰的弥散状条带。通过对比试验得出LAMP-PCR的灵敏度比常规PCR要高。对实验室多个转基因杨树无性系目的基因的检测,证明了LAMP-PCR在转基因林木外源基因检测中的较高可靠性。本研究在国内外首次采用环介导等温扩增技术检测转基因林木,建立了一套更简便、灵敏、快速、可靠的转基因林木的LAMP-PCR检测方法。该技术在恒温65℃的条件下保温90 min即可完成转基因林木的检测,既节省了时间,又降低了成本,为转基因林木的检测研究提供了一种新的技术。

摘要：以发根农杆菌30148为材料,设计了rolC基因的特异性引物,应用PCR技术,扩增出了正确序列的rolC基因585 bp片段,并利用pUCm-T载体对此片段进行了克隆,并进行了序列分析。所克隆rolC基因与已发表的序列相比较,核苷酸序列的同源性达到100%,但另一个克隆中部分碱基发生了改变,同源性达到99%。

摘要：从不同种源引进8个杨树优良无性系(107、108、111、BF-1、BF-2、2012、L-01、L-2),2018年在河北省滦南县、盐山县、阜城县3个试验地营建无性系对比试验林,试验采用完全随机区组设计,设置4个区组,每个区组设置8个小区,每个小区栽植9~14株,株行距为3 m×4 m,周围设置1列保护行;2018—2023年每年(2019年除外)秋季落叶后对3片试验林无性系树高、胸径、材积生长量进行持续测定;采用多点联合方差分析法、基因型主效应与基因型×环境相互作用(GGE)双标图法,对树高、胸径、单株材积进行多点联合方差分析,对基因型与环境的互作效应进行分析,计算无性系性状重复力、遗传增益,评价各无性系丰产性、稳定性,筛选适应各试验地的优良无性系。结果表明:3片试验林6年生生长性状对比,树高、胸径、单株材积的累计生长量均逐年提高。综合看,试验地阜城的无性系108生长最佳,滦南和盐山的无性系L-01生长最佳。以无性系为固定效应、地点为随机效应的联合方差分析表明,地点、无性系和无性系×地点3个条件时的生长性状均存在显著差异(P<0.05)或极显著差异(P<0.01),各无性系在不同立地条件时的生长性状不一致。GGE双标图分析表明,阜城为最佳测试地点、其次是盐山和滦南;阜城和盐山两地点间相关性最强,基因型与环境的交互作用对杨树的生长影响显著。依据各无性系在各试验地适应性综合生长性状及材积遗传增益,按照50%入选率,选出108、BF-2、2012、L-01为优良杨树无性系。杨树无性系间及在不同试验地,均呈现显著的生长差异,无性系与试验地呈现显著互作效应。综合评估8个6年生无性系,筛选出4个具有优良适应性和稳定性的杨树无性系;这些优良无性系可被视为优质品种,可在试验区域推广应用。

摘要：用部分改造的BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API-A)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法对三倍体毛白杨进行了转化,对转化后植株体内残存农杆菌在继代培养和移栽过程中进行了跟踪检测。结果表明:通过对转化再生植株的分子生物学检测,42个株系中,33个株系为阳性,阳性率达到80%;用Bt毒蛋白抗血清进行ELSA检测结果表明,7个转基因株系都有Bt杀虫蛋白表达;基因转化后,可采用附加50 mg/L卡那霉素,300 mg/L羧青霉素的筛选培养基消除细菌并进行抗性芽筛选。对28个转基因株系叶片、茎段和根段在含有卡那霉素50 mg/L YEB培养基上进行细菌培养,通过在T-DNA区、质粒Vir区和农杆菌基因组设计引物,进行PCR检测,证明有3个株系(333、7、5号)检测到残存工程农杆菌,并在组培瓶中存活24个月。将带菌的3个株系组培苗移栽到花盆中,室内培养1个月后,在33号株系根际土壤中检测到了目的农杆菌。