摘要：结构化、面向对象、基于组件等都是比较成熟的程序设计方法.借助这些方法的实现机理以及原型和分层思想以应用领域的业务元数据为依据,自动生成符合规范的程序代码,将推动程序设计方法和程序代码自动生成技术的进一步发展.而以此为基础的软件开发方法可有效地缩短开发时间、降低开发成本以及提高产品质量,解决当前软件工程领域存在的特色问题.

摘要：目的 探讨RNA靶向沉默Notch1基因对肾透明细胞癌的增殖、凋亡及蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（protein kinase B/mammalian target of rapamycin,Akt/mTOR）信号通路的影响.方法 设计针对Notch1基因小干扰RNA（siRNA）片段,经脂质体转染入786-0细胞,RT-PCR及蛋白印迹法检测其干扰效果;MTT法绘制细胞生长曲线,TUNEL法分析细胞凋亡,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3及Akt/mTOR信号途径相关蛋白Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化mTOR（p-mTOR）、磷酸化P70核糖体蛋白S6激酶（Phosphorylation P70 ribosomal protein S6 kinase,p-P70S6K）的表达.结果 Notch1 siRNA转染786-O细胞后,Notch1基因的mRNA、蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.经Notch1 siRNA 0、40、60、80、100、120 nmol/L作用24 h后,786-0细胞的增殖率分别为（98.51±1.33）％、（87.34±2.26）％、（64.72±3.24％）％、（57.68±3.32％）％、（31.91±1.85）％、（19.27 ±2.73）％,随Notch1 siRNA浓度的增加细胞增殖率下降,差异有统计学意义（F=47.65,P＜0.01）.0、40、80、120 nmol/L Notch1 siRNA处理786-O细胞24 h后,凋亡率分别为（7.6±3.8）％、（21.5±4.8）％、（32.3±3.5）％、（46.3±4.7％）％,随着Notch1 siRNA浓度的增加细胞凋亡率增加,差异有统计学意义（P＜0.05）;凋亡相关蛋白Bcl-2、pro-caspase 3的表达下降;干扰Notch1基因后Akt总蛋白未见明显变化,而p-Akt、p-mTOR、p-P70S6K的表达下降.结论 靶向沉默Notch1基因后,可抑制786-O细胞增殖,诱导细胞凋亡;沉默Notch1基因可通过去磷酸化抑制该Akt/mTOR信号通路.

摘要：目的探讨干扰沉默EZH2基因对肾癌ACHN细胞细胞株的增殖、凋亡及mTOR信号通路的影响。方法设计针对EZH2基因干扰RNA(shRNA),经脂质体将转染EZH2 shRNA入肾癌ACHN细胞,应用RQ-PCR及Western blot鉴定其干扰效果,MTT法绘制细胞生长曲线,TUNEL检测细胞凋亡的变化,Western blot检测组蛋白H3K27三甲基化水平(H3K27me3),凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Procaspase-3及mTOR信号通路蛋白mTOR、磷酸化mTOR蛋白(pmTOR)、磷酸化P70核糖体蛋白S6激酶(phosphorylation P70 ribosomal protein S6 kinase,p-P70S6K)的变化。结果EZH2 shRNA转染ACHN细胞48 h后,EZH2的m RNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),EZH2 shRNA组细胞增殖率明显低于Neg shRNA组和Control组(P<0.05),EZH2 shRNA组细胞的凋亡率为(45.57±5.26)%,而Neg shRNA组和Control组分别为(3.24±1.37)%、(1.65±0.94)%,差异有统计学意义(F=48.62,P<0.05)。促进凋亡蛋白Bax表达增强,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达减弱,凋亡执行蛋白前体Procaspase3减少。H3K27me3水平较Control组明显下降,而检测mTOR通路蛋白发现mTOR总蛋白未见明显下降,但是活性形式的磷酸化p-mTOR、p-P70S6K表达下降。结论干扰沉默EZH2基因可抑制肾癌ACHN细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是调节组蛋白H3K27me3水平变化,特异性抑制mTOR信号通路的活性。

摘要：目的系统评价抗氧化剂辅酶Q10(coenzyme Q10,Co Q10)治疗特发性少弱畸形精子症(idiopathic oligoasthenoteratozoospermia,i OAT)的有效性及安全性。方法计算机检索Pub Med、MEDLINE、EMbase、The Cochrane Library、CBM、CNKI、VIP和Wan Fang Data数据库,搜集Co Q10治疗i OAT的相关随机对照试验(RCT),检索时限均为从建库至2016年5月31日。由2位研究者独立进行文献筛选、资料提取,并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入7个RCT,共803例患者。Meta分析结果显示:与对照组相比,Co Q10组可明显提高i OAT患者的精子浓度[MD=3.37,95%CI(0.68,6.05),P=0.01]、a级精子百分率[MD=5.06,95%CI(3.84,6.28),P<0.000 01]、(a+b)级精子百分率[MD=7.72,95%CI(4.19,11.26),P<0.000 1]、正常形态精子百分率[MD=1.89,95%CI(0.63,3.16),P=0.003]和精液中Co Q10的水平[MD=40.02,95%CI(24.73,55.31),P<0.000 01];但不能明显改善血浆性激素水平[FSH:MD=–3.48,95%CI(–5.17,–1.79),P<0.000 1;LH:MD=–3.23,95%CI(–7.55,1.08),P=0.14;T:MD=0.45,95%CI(–3.31,4.20),P=0.82];此外,两组均未出现与药物相关的明显不良反应。结论抗氧化剂Co Q10可明显提高特发性男性不育症患者的精子浓度和精子活力,未见明显不良反应,但由于纳入研究存在较大的偏倚风险,证据强度较低,本研究结论尚需进一步开展设计严格的临床对照试验进行验证。