摘要：以诺丽果生物碱为研究对象,采用响应面法对超声辅助提取诺丽果生物碱的工艺进行优化。在单因素试验的基础上,选取提取时间、液料比、超声功率为自变量,诺丽果生物碱的得率为响应值,设计三因素三水平的响应面中心组合试验,分析不同因素对诺丽果生物碱得率的影响。得出诺丽果生物碱的最佳提取条件为提取时间38 min、液料比35∶1(mL/g)、超声功率450 W。在此条件下对试验结果进行验证,诺丽果生物碱得率为6.932 g/kg,基本与响应面模型的理论预测值相符。

摘要：为探究氮磷钾肥对辣木幼苗生长的影响,采用“3414”不完全回归施肥试验设计,测定不同处理组合下辣木幼苗的农艺性状及生物量等指标,同时对辣木幼苗的总生物量进行方程拟合,以期筛选出最大总生物量的氮、磷、钾推荐施肥量。结果表明:辣木幼苗地径、株高、壮苗指数、根干重、茎干重、叶干重、总生物量,施用氮肥的较不施肥增加475.67%、406.04%、84.70%、757.15%、7991.07%、17792.20%、2281.61%;施用磷肥的较不施肥增加29.11%、49.37%、100.15%、105.38%、141.89%、44.89%、96.48%;施用钾肥的,地径、株高、壮苗指数、根干重、茎干重较不施肥减少15.89%、15.86%、25.14%、30.53%、25.47%,叶干重、总生物量较不施肥增加4.18%、1.52%。氮磷钾之间存在不同程度的交互作用,对辣木壮苗指数的影响表现为P_(2)O_(5)>N>K_(2)O,对地径、株高、根干重、茎干重、叶干重、总生物量6个指标的影响表现为N>P_(2)O_(5)>K_(2)O,总体上,氮素对辣木幼苗农艺性状和生物量的影响最大,是影响辣木幼苗生长的首要因素。对辣木幼苗总生物量分别进行三元二次、二元二次、一元二次模型拟合,发现辣木幼苗的纯氮、纯磷、纯钾的推荐施肥量分别为6.43、3.10、0 g/株,适宜的比例为N∶P∶K=1∶0.48∶0。

摘要：为研究SPT和HEC及其相互作用对甘蓝雌蕊发育的影响,以结球甘蓝自交不亲和系E1为材料,提取雌蕊总RNA,根据拟南芥中SPT和HEC1基因设计引物,采用同源克隆方法克隆SPT基因,其序列1085 bp,开放阅读框(ORF)1062 bp;HEC1基因ORF 696 bp。通过cDNA推导得到的氨基酸序列表明,SPT编码353个氨基酸残基,预测分子量为37.67 kD,pI为6.83;HEC1编码231个氨基酸残基,预测分子量为25.26 kD,pI为10.2。两基因在各器官中均表达,但SPT在果实和雌蕊中表达量最高,而HEC1在根和花蕾中的表达量最高。为检测两者的相互作用,构建原核表达质粒pCold I-SPT和pGEX-HEC1,pull-down试验表明两蛋白能够在体外相互作用。同时构建pGBKT7-SPT、pGADT7-HEC1及互换载体pGBKT7-HEC1和pGADT7-SPT酵母表达载体,分别转化酵母Y2HGold和Y187感受态细胞后均未出现自激活和毒性现象,融合后的二倍体酵母均能在SD/–Trp–Leu–Ade–His/X-α-gal/AbA板上长出蓝色菌斑,表明SPT和HEC1能够相互作用激活下游的HIS3、AUR1-C、MEL1和ADE2报告基因,酵母双杂交试验结果与Pull-down检测一致,说明SPT和HEC1能够相互作用以调控雌蕊的发育。

摘要：以结球甘蓝E1为材料,提取花蕾总RNA,反转录cDNA。根据拟南芥SPT基因设计引物,采用同源克隆的方法从中克隆SPT基因序列1 085 bp,开放阅读框1 062 bp。通过cDNA推导得到的氨基酸序列分析表明,BoSPT编码353个氨基酸残基,预测分子量为37.67 kD,pI为6.83。经过EcoRⅠ和KpnⅠ限制酶双酶切后,构建原核表达质粒pET43.1a-BoSPT转化表达菌株*** Rosetta(DE3),通过SDS-PAGE检测该蛋白的表达。经Smart-embl预测其具有bHLH家族结构域,位于序列第173~221位氨基酸残基处。进化树表明结球甘蓝BoSPT与拟南芥AtSPT和筷子芥AlSPT的亲缘关系较近。BoSPT基因的原核表达得到纯化的融合蛋白。