摘要：目的:建立检测Y染色体微缺失的多重PCR体系。方法:参照欧洲男科协会和欧洲分子遗传实验室质控网推荐的6个特异性序列标签(STS),并在此基础上增加9个STS,依据Y染色体上15个STS设计引物,以性别决定基因(SRY)为内参建立多重PCR体系;对无精症组、严重少精症组、精液正常组及其它组(精液参数至少一项低于参考值)进行Y染色体微缺失检测。结果:建立的15个STS多重PCR体系检测到无精子症组缺失率为5.9%,严重少精子症组缺失率为17.2%,精液正常组及其它组中未发现缺失。多重PCR检测的特异性为100%,未发现假阳性或假阴性结果。结论:多重PCR检测Y染色体微缺失具有操作简单、快捷,结果可靠、重复性好,在辅助生殖临床检测上有重要应用价值。

摘要：目的通过多重PCR及细胞遗传学技术,探讨导致男性无精症及严重少精症的遗传原因,调查无精症及严重少精症患者Y染色体微缺失及染色体异常的类型及分布频率。方法利用Y染色体上15个特异性序列标签(STS)设计引物,采用多重PCR的方法对无精症及严重少精症组73例对象、精液正常对照组138例对象的外周血DNA进行Y染色体微缺失的分子遗传学检测,同时采用外周血淋巴细胞培养G显带方法进行细胞遗传学分析。结果无精症及严重少精症患者Y染色体微缺失发生的频率为9.6%,缺失的位点涉及到AZF(无精子因子)的3个区域,其中AZFb缺失率为1.4%,AZFc缺失率为8.2%,AZFd缺失率为9.6%,缺失率极显著的高于精液正常对照组(P<0.01);细胞遗传学研究检测到7例染色体核型异常,异常核型频率为9.6%,正常精液对照组未检测到染色体核型异常,两者染色体核型异常率差异极显著(P<0.01)。结论不育男性特别是无精症及严重少精症患者染色体核型异常及Y染色体微缺失的发生率较高,Y染色体微缺失及细胞遗传学检测可为不育患者提供治疗前的遗传咨询,避免遗传缺陷垂直传递给后代。

摘要：目的探讨Y染色体长臂1区1带（Yq11）微缺失与男性不育的关系。分析Y染色体微缺失的发生率及缺失类型。方法利用Yq11上15个特异性序列标签位点（STS）设计引物，采用多重PCR的方法，分别对无精子症组（n=41）、严重少精子症组（n=29）、少精子症组（n=22）、精子活力异常组（n=55）及正常对照组（n=83）的血样DNA进行15个STS的扩增；然后利用琼脂糖凝胶电泳检测位点的缺失，统计Y染色体微缺失的发生率及位点缺失率，将位点的缺失类型与男性生育力参数进行对比分析。结果Y染色体微缺失总的发生率为3.5％，其中无精子因子（AZF）a位点未见缺失，AZFb位点缺失率为0．87％，AZFc位点缺失率为3％。AZFd位点的缺失率为3．5％。严重少精子症组与精子活力异常组及正常对照组的差异均有统计学意义（均P〈0．05），其他各组间的差异均无统计学意义（均P〉0．05）。无精子及严重少精子症者中8例Y染色体微缺失，缺失率11．4％；少精子症者及正常精子浓度者均无Y染色体微缺失。无精子及严重少精子症者Y染色体微缺失率显著高于少精子症者及正常精子浓度者（均P〈0．01）。检测发现3种类型的缺失，分别为单独D位点缺失，C、D位点联合缺失，B、C、D位点联合缺失。结论Y染色体微缺失是导致精子发生障碍的一个遗传原因，Y染色体微缺失的发生与精子浓度密切相关，可导致男性出现无精子症或严重少精子症，从而导致男性不育。