摘要：背景:RNA干扰技术通过将具有一定结构特点、长19～25bp的双链小干扰RNA导入哺乳动物细胞,特异性降解与其序列具有同源性的mRNA分子,导致目的基因表达抑制。目的:拟构建针对人血管紧张素原mRNA的小干扰RNA表达载体,从而抑制肾素基因在脂肪细胞的表达。方法:从NCBI中查找人血管紧张素原基因全长mRNA序列(NM000029),利用GeneScript公司提供的在线小干扰RNA模板序列设计软件,自行设计靶向血管紧张素原的两条shRNA的DNA模板单链,合成靶向血管紧张素原基因转录可形成茎环结构的寡聚核苷酸,退火后与酶切后的psiRNAT-U6.1/Neo质粒连接,在TOP10菌株中扩增,并测序鉴定。结果与结论:将含有血管紧张素原-mRNA目标序列19bp的双链DNA插入片段,连接到pRNAT-U6.1/Neo质粒形成重组质粒。EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,空载体得到351bp小片段,而人重组质粒得到397bp小片段,与预期相符。EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切后,空载体得到1条345bp小片段,而人重组载体没有得到小片段条带,与预期相符。测序结果表明psiRNAT-U6.1/Neo质粒已经插入人脂肪细胞的干扰合成片段,无碱基突变,成功构建了靶向血管紧张素原-小干扰RNA表达载体。

摘要：针对两歧双歧杆菌的营养需要,采用正交实验设计优化增殖培养基。结果表明,酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素。最佳的优化培养基配比是:酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.3%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.0%,双歧因子0.8%,生长因子10%(均为质量分数)。用经优化的增殖培养基配方测定两歧双歧杆菌的生长曲线及其pH值的变化,确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18h,此时平板菌落计数的菌数可高达2.1×1010mL-1。

摘要：背景：分离纯化生物活性肽的方法主要是酶解法,分离产物为多肽混合物,易受微生物侵染,发生变质,分离过程复杂,产量较低;而采用化学合成方法成本又很高。目的：观察以基因工程法高效表达的降血压肽在不同外界条件下的稳定性和活性,及其在体内的降压效果。设计、时间及地点：对比观察实验,2007-11/2008-04在深圳职业技术学院生物技术实验室完成。材料：10周龄雄性原发性高血压模型Wistar大鼠40只,10周龄雄性正常Wistar大鼠10只。原发性高血压模型大鼠收缩压在180mmHg（1mmHg=0.

摘要：通过设计正交试验,对重组Pichiapastrois酵母利用YEPD培养基表达纳豆激酶基因的发酵条件进行了研究,确定最适条件:pH值6·0,培养温度30℃,培养时间36h,诱导时间84h,甲醇添加量1·0%,其中培养温度为主要影响因素。在该条件下进行重组子的培养及诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明外源蛋白的表达量占菌体蛋白的10%。

摘要：目的:构建靶向血管紧张素原(AGT)基因的RNA干扰质粒,研究AGT基因对鼠前脂肪3T3-L1分化的影响。方法:设计靶向AGT的小分子RNA干扰片段(AGT-shRNA),以未靶向任何DNA的小分子RNA(Non-shRNA)为对照,利用载体psiRNA-U6.1/Neo构建重组表达质粒,转染鼠前脂肪细胞3T3-L1并筛选到稳定转染细胞株,RT-PCR和SDS-PAGE法分别检测AGT基因沉默效果,通过显微镜观察和脂肪细胞分化标志物检测来确定AGT基因干扰对3T3-L1细胞分化的影响。结果:成功构建AGT干扰质粒,与对照组比较,AGT基因转录水平受到显著抑制(P<0.05),AGT蛋白表达水平也仅为对照的43.86%。AGT基因干扰后3T3-L1细胞脂质水平和甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH)活性仍随分化时间延长呈上升趋势,但增长量明显低于对照组(P<0.05)。结论:RNA干扰AGT基因可明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,提示脂肪组织中的肾素-血管紧张素系统(RAS)与脂肪代谢有重要关联。

摘要：目的建立适用于肉类产品中单核增生李斯特氏菌的荧光PCR检测方法。方法根据单增李斯特氏菌溶血素基因hlyA,设计合成引物和荧光探针,结合免疫磁珠筛选,选择简便的DNA提取方法,建立适用于检测肉类制品中单增李斯特氏菌的荧光PCR方法。对该方法进行特异性、灵敏度及模拟样品检测效果的研究。结果对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株,及混合菌液的检测,结果显示该方法具有良好的特异性。对染菌模拟样本的检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h。结论免疫磁分离荧光PCR方法为快速、简便和准确检测肉类制品中单增李斯氏菌提供了一个新的途径。

摘要：工业微生物学作为实践性很强的应用学科,传授工业微生物学实验技术的重要程度绝不亚于理论课程。我们继承传统,注重基础技能的训练,优化课程组织形式,不断完善教学模式和体系的同时,我们不断开拓创新,增强实验的综合性及设计性,深化工业微生物学实验教学改革。

摘要：针对两歧双歧杆菌的营养需要,采用正交试验设计优化增殖培养基,结果表明,酵母膏是影响短双歧杆菌的显著因素,最佳的优化培养基配比是:酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.3%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.0%,双歧因子0.8%,生长因子10%.用经优化的增殖培养基配方测定两歧双歧杆菌的生长曲线及其pH的变化,确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18 h,此时平板菌落计数的菌数可高达2.1×1010cfu/ml.

摘要：本研究针对短双歧杆菌的营养需要，采用正交实验设计优化增殖培养基，结果表明，酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素，最佳的优化培养基配比是：酵母膏0．9％，胰蛋白胨0．6％，大豆蛋白胨0．6％，葡萄糖0．6％，双歧因子0.2％，生长因子10％。用经优化的增殖培养基配方测定短双歧杆菌的生长曲线及其pH的变化，确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18h，此时平板菌落计数的菌数可高达1．5×10^10cfu／ml。

摘要：生物制药工艺学是制药工程专业的一门主要的专业理论课,我们结合网站的使用构造成精品课程,这将推动教学改革、提高教学效果。文章介绍了精品课程建设的意义,精品课程与网络结合的意义以及网站建设的具体情况等。