摘要：目的:利用RNA干扰技术探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFB)的抑制效果。方法:将针对人GSK-3β基因设计合成的3对特异性小干扰RNA(siRNA)分别转染体外培养的人KFB,通过RT-PCR和Western blot筛选出干扰人KFB GSK-3β基因表达的最佳siRNA,进而转染人KFB,并用RT-PCR和Western blot检测GSK-3β及相关蛋白的m RNA和蛋白表达。结果:1434序列具有最佳的GSK-3βm RNA和蛋白抑制效率。转染GSK-3βsiRNA后,KFB的β-catenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-GSK-3β和Wnt2的蛋白水平下降,KFB活力下降,且随着培养时间的延长,细胞生长受抑制程度增大,细胞倍增时间明显延迟。结论:转染靶向GSK-3β的siRNA可有效降低该基因在KFB内的表达,从而抑制了瘢痕疙瘩生长,具有潜在的治疗前景。

摘要：医学类高职教育是一种特殊的高等职业教育,所以医学类高职教育的定位和人才培养的要求既不同于普通高等教育培养的研究型、设计型人才,也不同于中等职业教育培养的技术技能型人才,要有其自身的特点,即教学上应突出高职的特色,尤其应加强实践教学。

摘要：目的 :探讨RNA干扰技术(RNAi)靶向抑制卷曲蛋白(Frizzled)受体对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)的抑制作用。方法:将针对人Frizzled受体基因设计合成的3对特异性小干扰RNA(si RNA)分别转染体外培养的人KFB,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)和western blot筛选出干扰人KFB Frizzled受体基因表达的最佳si RNA,进而转染人KFB,并采用q PCR及western blot检测Frizzled受体及相关基因和蛋白表达;采用细胞增殖检测试剂(CCK)-8检测细胞增殖情况。结果:si RNA303具有最佳的Frizzled受体m RNA和蛋白质抑制效率,Frizzled受体si RNA转染后,KFB的Frizzled受体、Wnt2、糖原合酶激酶(GSK)3β和D型细胞周期蛋白(cyclin D)1 m RNA及蛋白表达均下降。p-GSK3β蛋白表达下降,KFB生长受抑制程度增大,增殖减慢,且随着培养时间的延长,细胞倍增时间明显延迟。结论:转染靶向Frizzled受体的si RNA可有效敲低该基因在KFB内的表达,从而抑制成纤维细胞增殖。