摘要：目的:观察抑制Galectin-3表达与BT-549细胞系增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为三阴性乳腺癌基因治疗方法的可行性。方法:设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并顺势转染乳腺癌细胞系BT-549(为Galectin-3siRNA组),以未转染细胞为空白对照,以转染阴性干扰为阴性对照,荧光倒置显微镜和实时定量PCR验证干扰结果,XTT方法观察干扰后24、48、72和96h各组细胞增殖吸光度(A值),流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况,以上实验均重复3次。结果:空白对照组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组Galectin-3mRNA相对含量分别为(0.078±0.003)、(0.069±0.004)和(0.015±0.001),差异有统计学意义,F=486.97,P<0.001。XTT法检测结果显示,同一组不同时间点之间差异有统计学意义,P值均<0.001;同一时间点各组之间差异亦有统计学意义,P值均<0.001。随着时间推移,空白组和阴性对照组细胞继续生长,Galectin-3siRNA组细胞生长抑制,数量逐渐减少,干扰时间和实验分组之间存在交互效应,F=26.43,P<0.001。流式细胞仪检测结果显示,Galectin-3siRNA组、空白对照组和阴性对照组凋亡率分别为(26.83±2.15)%、(2.73±0.18)%和(5.86±0.51)%,差异有统计学意义,F=24 537.92,P<0.001。空白对照组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组愈合率分别为(91.47±4.39)%、(82.36±3.68)%和(52.26±1.95)%,差异有统计学意义,F=213.71,P<0.001。转染Galectin-3siRNA的乳腺癌细胞浸润穿过Matrigel膜的细胞数(169.36±23.71)要比空白对照组(480.80±30.80)和阴性对照组(320.70±28.12)的细胞数显著减少,差异有统计学意义,F=115.20,P<0.001。结论:Galectin-3siRNA成功转染入BT-549细胞,并抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低其迁移侵袭能力,为三阴性乳腺癌基因治疗提供实验依据。

摘要：目的观察半乳凝集素-3(Galectin-3)表达与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为抗肿瘤基因治疗的方法。方法设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231(Galectin-3siRNA组),以未转染细胞为空白对照组,以转染无关siR-NA为阴性对照组。荧光倒置显微镜和实时定量PCR检测干扰结果,MTT法观察干扰后24、48、72、96 h各组细胞增殖吸光度(A)值,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况。结果①转染后24 h,荧光倒置显微镜显示转染效率为(80.60±5.62)%,实时定量PCR提示Galectin-3siRNA转染后相应Galectin-3的表达明显下降(P<0.01);②干扰后24、48、72、96 h Galectin-3siRNA组细胞继续生长,但细胞生长减慢,抑制率低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);③流式细胞术分析发现,Galectin-3siRNA组比空白对照组和阴性对照组凋亡率高(P<0.01);④Transwell侵袭实验显示Galectin-3siRNA组穿膜细胞数少于空白对照组和阴性对照组。细胞划痕实验显示Galectin-3siRNA组细胞迁移能力明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01)。结论RNA干扰能抑制Galectin-3的表达以及MDA-MB-231细胞的增殖,并诱导细胞凋亡、降低其迁移侵袭能力。

摘要：基于有限差分法 ,分别采用模数法和近似传热法实现了对任意形状铸件凝固时间的快速计算 ,由此可获得铸件的热节分布规律 ,为设计人员从铸件结构工艺性的角度校核结构设计的合理性以及为铸造工艺人员设计铸件的补缩系统提供了可靠依据。通过对航空铸件进行验证 ,表明所建立的模型在改进铸件开发过程中具有较好的适用性。

摘要：从可靠性、重量尺寸、经济性、机动性等十个方面介绍大功率动力装置对舰船主锅炉的技术要求。它对设计大型舰船主锅炉具有指导意义，对设计民用锅炉也具有一定的参考价值。

摘要：为了分析挤出成型过程中模具结构参数对七孔硝基胍发射药离模膨胀率及流动均匀性的影响规律,采用计算流体力学方法,对挤出成型过程进行模拟计算,讨论了模具各结构参数重要性的主次关系;对七孔发射药制备模具进行了结构优化,并进行了实验验证。结果表明,模具收缩角对膨胀率和药料出口速度均匀性的影响最大,压缩段高度次之,成型段长度的影响最小。模具优化后流道出口端速度分布均匀性提高36.53%,表明该模拟计算的可靠性与实用性。

摘要：目前外墙外保温各类质量问题层出不穷,本文通过对无锡地区的外墙保温现状作摸底调查;选取各类型的典型外墙外保温体系,对其各类质量问题进行分类调查统计,得出了各类外保温体系质量问题的量化结果,并总结归纳了产生质量问题的原因;分析了各类外保温体系的优缺点,并提出了设计、施工、保修维护的若干建议。

摘要：无线传感器网络无论是在国家安全,还是在国民经济诸多方面都有着广泛的应用前景。无线传感器网络技术综合了传感器技术、嵌入式计算机技术、现代网络及无线通信技术、分布式信息处理技术等,是一个多学科高度交叉的新兴前沿研究领域,在当今备受国内外关注。本文针对无线传感器网络技术在实际应用中的特点,利用Chipcon公司的CC2420射频收发器芯片,设计一个基于IEEE802.15.4/Zigbee协议的无线传感器网络节点,实现了传感数据的采集和传输。

摘要：长治1000 kV变电站配套电厂1000 kV送出工程是长治—南阳—荆门1000 kV特高压输电工程重要配套电源项目。由于工程建设时序的需要,需在赵庄电厂外将两回线路短接以设置临时过渡方案,以满足高河电厂先行送电需求。常规短接方案电厂停电时间长,重复进场施工造成协调难度极大,不利于工程建设。通过在赵庄电厂外双回路终端塔上加装T型跳线横担,实现了两回线路导线短接,经三维仿真校验,电气距离均满足规程规范要求。

摘要：目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果:克隆得到全长2043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24~46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础。

摘要：利用活齿齿形加工原理，对〈苏〉５３２型滚齿机进行了技术改造设计，实现了准确、经济、高效地加工外波式活齿减速器波形轮齿形的目的，为活齿减速器的推广应用创造了良好条件。