摘要：目的 基于在中国南方开展的一项病例对照研究,分析不同样本来源的Epstein-Barr病毒(EBV)高危亚型与鼻咽癌发生风险的关系,并评估其在鼻咽癌诊断中的价值。方法 于2020-2021年在广东省招募150例新诊断鼻咽癌患者(鼻咽癌组)和150名非鼻咽癌健康人群(对照组),病例分别来自中山大学肿瘤防治中心鼻咽科及广东省四会癌症中心鼻咽癌高发区筛查队列。采用酶联免疫吸附试验检测EBV衣壳抗原IgA抗体(VCA-IgA)和EBV潜伏感染时表达的核抗原1 IgA抗体(EBNA1-IgA),并计算EBV抗体评分。同时采用多重PCR法,对鼻咽刷子和唾液中EBV高危亚型(BALF2_162476T>C、BALF2_163364C>T、BALF2_162215C>A、RPMS1_155391G>A、LMP1_WT>del)检测,分析其与鼻咽癌发生风险的关系,比较EBV抗体评分及不同标本来源BALF2对鼻咽癌的诊断效果,进一步将二者联合并评估其对鼻咽癌鉴别诊断的效能。结果 鼻咽癌组晚期(Ⅲ、Ⅳ期)占90.67%(136/150),早期(Ⅰ、Ⅱ期)占9.33%(14/150)。鼻咽癌组中EBV抗体评分为高危占80%,高于对照组的2%,差异有统计学意义(χ^(2)=227.024,PC、BALF2_163364C>T、BALF2_162215C>A、RPMS1_155391G>A、LMP1_WT>del)阳性率均高于对照组,差异均有统计学意义(χ^(2)=18.766、21.054、59.883、26.124、20.402,P均del阳性率最高分别为93.84%、71.08%;所有亚型检出率在早晚期患者之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。鼻咽癌组唾液来源BALF2_162476T>C、BALF2_163364C>T、BALF2_162215C>A、RPMS1_155391G>A阳性率均高于对照组,差异均有统计学意义(χ^(2)=8.063、8.633、8.033、14.909,P均A检出率高于早期(85.59%vs. 55.56%),差异有统计学意义(P=0.041);其余高危亚型检出率在早晚期患者之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。鼻咽刷子来源BALF2_162215C>A与鼻咽癌风险关系最强(OR=13.36, 95%CI:6.70~28.27, P<0.001)。将BALF2(162215-162476-163364)单倍体的变异进行组合,以3个低风险变异BALF2(A-T-C)作为参考时发现,鼻咽癌组鼻咽刷子样本来源中携带3个高危亚型的EBV变异检出率较高(76.71%),且与鼻咽癌的风险显著相关(C-C-T:OR=17.23, 95%CI:8.33~37.94,P<0.001);单倍型BALF2(C-C-C)和BALF2(C-T-C)与鼻咽癌风险的OR逐渐递减(C-C-C:OR=10.34,95%CI:3.32~37.18,P<0.001;C-T-C:OR=4.31, 95%CI:1.23~15.65, P=0.022);唾液样本来源中仅有BALF2(C-C-T)与鼻咽癌的风险显著相关(OR=2.93,95%CI:1.57~5.58,P=0.001)。鼻咽刷子来源EBV BALF2单倍体对鼻咽癌诊断的敏感性和特异性分别为88.67%和76.67%,将其与EBV抗体评分联合可将标志物的特异性提升至95.33%,同时保持敏感性85.33%。结论 不同标本来源的EBV高危亚型与鼻咽癌发生关系密切,结合EBV抗体评分和鼻咽刷子中的BALF2单倍体对鼻咽癌筛查有潜在价值。