摘要：目的遗传因素可增加抑郁症的发病风险,本研究通过分析13个候选基因与抑郁症的关联,探讨中国汉族人群抑郁症的遗传风险因子。方法采用病例对照研究。选择2020年2月至2021年9月在广州医科大学附属脑科医院情感障碍科、成人精神科和老年科住院的439例抑郁症患者作为病例组,男性158例、女性281例,年龄为(29.84±14.91)岁;464名体检健康者作为对照组,男性196名、女性268名,年龄为(30.65±12.63)岁。应用基质辅助激光解吸电离飞行时间(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight,MALDI-TOF)质谱仪分析所有受检对象的13个候选基因20个位点。性别比较采用Pearson卡方检验,年龄和基因型分布的比较采用独立样本t检验。采用PLINK软件中“哈迪-温伯格”和“等位基因频率”程序用于分析哈迪-温伯格平衡与基因频率,采用PLINK软件中“标准病例/对照关联测试”、“Max(T)置换”和“Bonferroni多次测试校正”程序用于分析基因与疾病的关联。结果PLINK分析显示,Bonferroni校正前SCN2A rs17183814、ABCB1 rs1045642与CYP2C19*3 rs4986893、NAT2*5A rs1799929与抑郁症有关联(χ^(2)=10.340,P=0.001;χ^(2)=11.010,P=0.001;χ^(2)=9.781,P=0.002;χ^(2)=4.481,P=0.034)。以上位点在对照组中的较小等位基因频率分别为12.07%、43.64%、2.59%和3.88%;病例组中较小等位基因频率分别为17.43%、35.99%、5.47%和6.04%;比值比(odds ratio,OR)分别为1.538、0.726、2.178和1.592。采用Max(T)置换程序经1000000次置换测试后上述4个位点的差异仍有统计学意义,经验P值(EMP1)分别为0.002、0.001、0.003和0.042。Bonferroni校正后,只有SCN2A rs17183814、ABCB1 rs1045642与CYP2C19*3 rs4986893位点的差异有统计学意义,校正后P值分别为0.026、0.018和0.035。结论SCN2A rs17183814、ABCB1 rs1045642与CYP2C19*3 rs4986893位点与抑郁症易感性有关,其中SCN2A rs17183814与CYP2C19*3 rs4986893的A等位基因可能是中国汉族人群抑郁症的危险因素,而ABCB1 rs1045642的T等位基因可能为中国汉族人群抑郁症的保护因素。

摘要：研究 Ａ８３点突变的生物学意义。采用分子生物学方法，设计引入 Ｋｐｎ　Ｉ和 Ｈｉｎｄ　ＩＩＩ酶切位点的引物扩增乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的ＰｃＰ１０标准株中的Ｐｒｅ—Ｃ／Ｃ片段（１８１４—２４５２），经Ｋｐｎ　Ｉ和Ｈｉｎｄ　ＩＩＩ双酶切后，在Ｔ４ＤＮＡ连接酶的作用下连于ＥＢ病毒真核表达载体，利用定点突变技术对连接载体进行１８９６点的定点诱变。经错配ＰＣＲ—ＲＦＬＰ和测序分析，确定突变的克隆。提取突变前后的质粒转染 ＨｅｐＧ２细胞。突变后在 Ｐｒｅ－Ｃ／Ｃ第２８位氨基酸形成终止密码，使ＨＢｅＡｇ合成终止，转染ＨｅｐＧ２细胞后未能检测到ＨＢｅＡｇ，而未突变的重组质粒则ＨＢｅＡｇ表达为强阳性。ＨＢＶ Ａ８３点突变真核表达载体的构建为体外研究该点突变对ＨＢｅＡｇ表达的影响以及ＨＢｅＡｇ阴性的乙型肝炎病毒感染的致病机理奠定基础。

摘要：目的证实PS-1环状RNA(Cir-PS1-615)的存在,建立Cir-PS1-615的检测方法,并对其与AD的关系进行初步研究。方法采用反向PCR后克隆测序的方法,在人神经母细胞瘤SY5Y细胞对PS1基因的十二个外显子设计引物分别检测,发现可能存在的环状RNA,并对30例AD患者及对照组全血进行RT-qPCR检测。结果证实了PS1基因第2-5外显子有环状RNA的存在(Cir-PS1-615),对AD患者与对照组血液进行检测,发现AD患者与对照组血液Cir-PS1-615有差异表达。结论 PS1环状RNA Cir-PS1-615可能成为AD新的临床诊断标志物。

摘要：采用分子生物学方法 ,设计引入KpnⅠ和HindⅢ酶切位点的引物扩增HBV的Pre C/C片段 (1814～ 2 45 2 ) ,经酶切后连于EBO真核表达载体 ,利用定点突变技术分别对连接载体进行T186 2 ,A1896 ,A1899,A1896 +A1899点的定点诱变。经错配PCR RFLP和测序分析 ,确定突变的克隆。将突变前后的质粒以脂质体转染法转染HepG2细胞 ,检测不同点突变后HBeAg表达的改变。突变前后的质粒转染HepG2细胞经稳定表达 ,结果未突变的EBO PreC/C重组质粒HBeAg表达为强阳性 ,A1899突变的重组质粒HBeAg表达比未突变的重组质粒稍弱 ,而转染EBO空载体和T186 2 ,A1896 ,A1896 +A1899重组质粒突变体的细胞培养上清HBeAg均为阴性。

摘要：目的　建立乙型肝炎病毒 (HBV)S基因聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)的基因型分型方法并验证其准确性。方法　比较GenBank中HBV 2 2 3株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列 ,设计限制性内切酶BsrI、StyI、DpnI和HpaII鉴别HBVA F基因型的方法。选择经前SPCR PFLP的方法已鉴定出的HBVB、C和D基因型标本各 3 0例 ,用此方法鉴定验证 ,并随机对HBVB、C和D基因型各 3株标本进行S基因测序证实。结果　两种PCR RFLP及S基因测序鉴定HBV基因型结果一致。结论　S基因PCR RFLP的方法能够准确鉴定HBV基因型。此方法灵敏性高 ,特异性强 ,且酶切图谱简明单一 ,易于识别 ,适宜于HBV基因型的流行病学调查。