摘要：目的:预测人肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)基因上的泛素化位点,并构建泛素化位点突变质粒,探讨突变质粒对人结直肠癌HCT116和SW480细胞中核因子κB(NF-κB)和激活蛋白1(AP-1)相对荧光素酶活性的影响。方法:采用UbPred、UbiSite和BDM-PUB软件预测TRAF6基因的泛素化位点,采用CE Design V1.04软件设计突变引物,采用突变试剂盒进行定点突变,采用PCR法扩增获得突变后的目的片段,扩增产物经Dpnl酶消化,去除甲基化模板质粒,消化产物在ExnaseⅡ催化作用下发生同源重组获得重组质粒;将重组质粒转化至DH5α大肠杆菌感受态细胞,对重组质粒进行DNA测序。采用双荧光素酶报告基因系统检测转染突变质粒后HCT116和SW480细胞中NF-κB和AP-1相对荧光素酶活性。结果:经过DNA测序,泛素化突变位点已经成功突变,泛素化突变质粒构建成功。与TRAF6野生型基因比较,转染第124、319和331位突变质粒后,结直肠癌HCT116和SW480细胞中NF-κB和AP-1相对荧光素酶活性降低(P<0.05或P<0.01),其中转染第124位突变质粒后,结直肠癌HCT116和SW480细胞中NF-κB和AP-1相对荧光素酶活性降低最明显(P<0.01)。结论:成功构建人TRAF6基因的泛素化突变质粒,TRAF6的第124位氨基酸是其最重要的泛素化位点,可能影响下游信号通路中NF-κB和AP-1的活性。

摘要：为了解决传统算法在求解移动机器人路径规划问题中所存在的收敛速度慢、容易陷入局部最优等缺陷,提出了一种改进的离散鲸鱼优化算法.首先,采用蚁群算法对种群进行初始化,提高初始解的质量;其次,利用改进的非线性收敛因子平衡算法的全局勘探和局部搜索能力,避免算法陷入局部最优;最后,结合路径规划问题设计了交叉算子、变邻域搜索算子和变异算子改进鲸鱼算法的更新公式,提升了算法的收敛速度和搜索精度.通过TSPLIB标准算例库,将改进算法与其他算法进行对比,验证了算法改进的有效性.在不同规模的全局路径规划仿真环境下,实验结果表明:改进的算法可快速且稳定地获取全局最优路径,有效缩短路径长度、减少路径拐点数,在路径规划问题上具有良好的适用性.

摘要：随着城市建设规划的发展,造成地上商业土地资源紧缺,为缓解商业土地资源的不利形势,国内采取将商业建筑向地下延伸和开发的方式,目前该类建筑的主要类型有下沉式商业街、下沉式广场的商业配套用房、城市地下交通型商业配套用房。