摘要：目的表达和纯化肠道病毒71型(EV71)3C蛋白酶并通过与抑制剂相互作用预测其活性位点。方法将3C蛋白酶片段克隆至pET-28a原核表达载体,重组质粒导入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,获得3C蛋白酶融合蛋白,经Ni-NTA柱亲和纯化后以荧光多肽为底物检测3C蛋白酶的活性。使用AutoDock模拟3C蛋白酶与芦丁(Rutin)和芦平曲韦(Lupintrivir)对接。结果经酶切、PCR、测序证明pET28a-3C重组质粒构建成功,表达产物分子质量约23×10~3,纯化的3C蛋白酶酶活较好;对接结果表明Rutin和Rupintrivir通过形成氢键网和疏水键与3C蛋白酶底物结合位点结合,结合的活性氨基酸残基有His161、Gly163、Gly164、Phe170。结论成功制备了具有生物学活性的高纯度EV71 3C蛋白酶,建立了预测能力较好的对接模型,为以3C蛋白酶为靶点的药物设计和筛选奠定了基础。

摘要：针对灵昆车辆段上盖工程原灌注设计桩长下部成桩效率低、经济性差等问题,采用钻孔灌注桩桩底复合式后压浆技术进行桩长优化设计,并对经济性进行对比分析。研究结果表明:与开式后压浆试桩相比,采用复合式后压浆工艺其试桩单桩承载力提高34%~77%;温州地区桩端持力层为卵石层,通过注浆压力控制注浆速度,采用间隙注浆工艺,并确定一定的注浆量可确保注浆效果;通过桩基优化设计,原设计直径800、1000 mm桩进入卵石层长度减少8 m和13 m,造价分别节约1.35%、12.85%,工期缩短33.33%、50%,经济效益及工期效益显著。