摘要：目的:利用Box-Behnken响应面法优化六神曲中2种优势菌的协同发酵工艺。方法:利用米根霉Rhizopus oryzae、扣囊复膜孢酵母Saccharomycopsis fibuligera 2种优势菌协同六神曲发酵,在《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》第19册中六神曲组方的基础上,以蛋白酶活力和淀粉酶活力为评价指标进行发酵工艺单因素考察,进而采用Box-Behnken响应面法设计四因素三水平试验,并结合CRITIC权重法计算2种酶活力的综合得分,优化筛选六神曲2种优势菌协同发酵工艺。结果:以米根霉和扣囊复膜孢酵母按1∶2接种比例和15%总接种量接种于六神曲基质,32.5℃温度下发酵6 d制得六神曲,与同一厂家的9批商品六神曲相比,自制六神曲的酶活力批次间更稳定。结论:优化后的两菌协同发酵六神曲批间质量更加稳定。