摘要：目的研究皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)早期诊断。方法利用PCR方法,设计TCRVγ1-8、Vγ9、Jγ1/γ2特异引物,分析24例各类型CTCL,2例可疑CTCL及4例非特异性红皮病患者的33份皮肤和6份淋巴结石蜡标本的TCRγ鄄GR克隆性,30例炎性皮疹石蜡标本为阴性对照。结果39份标本中38份示TCRVγ1-8,37份示Vγ9呈MCGR、BCGR或OCGR。尤其是13例早期蕈样肉芽肿,2例可疑CTCL和4例非特异性红皮病均呈TCRγ鄄GR克隆性扩增带。6例炎性病变标本示TCRγ鄄GR克隆性,提示他们为“克隆性皮炎”,需长期随访。结论用PCR发现早期CTCL的TCRγ鄄GR克隆性,为诊断提供依据。

摘要：Presenilin1(PS1)的突变是早发家族性老年痴呆发生的重要因素之一。目前对于PS1结构和功能的研究表明,PS1作为一种多次跨膜并具有γ-secretase活性的蛋白酶,很可能参与众多的细胞信号传导通路,影响细胞分化和调亡、组织及个体的发育等等。但对于PS1的精细结构和功能目前了解甚少,为探讨PS1的精细结构和功能,本研究构建了鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体。方法:我们设计了扩增PS1的cDNA全长的引物,以C57BL/6小鼠9天胚的RNA为模板,利用RT-PCR的方法从C57BL/6小鼠9天胚中获得PS1的cDNA,经测序确认后,将其克隆到pMD18-TVector中。设计引物:上游5’-GCCGAATTCTATGACAGAGATACCTGCACC-3’;下游5’-GAAGGATCCGATATAAAACTGATGGAATGC-3’,上游含有EcoRI酶切位点,下游含有BamHI酶切位点。利用高保真DNA聚合酶通过PCR方法将pMD18-T-PS1质粒中的PS1基因亚克隆到pEGFP-C1载体中,获得pEGFP-C1-PS1融合蛋白表达载体,然后利用EcoRI和BamHI从pEGFP-C1-PS1融合蛋白中切下PS1基因,从pMD18-T-PS1质粒中切下载体部分,经过连接,获得中间载体,利用该重组载体中的EcoRI和SalI酶切位点,酶切连接入pEGFP-N2载体中,获得pEGFP-N2-PS1融合蛋白表达载体,经测序鉴定后备用。

摘要：细胞生物学是高校生命科学学院本科生必修的专业基础课程,它是与现代科学研究联系最紧密,以及应用最广泛的生物学课程之一。而细胞生物实验教学既是培养学生观察能力和实验能力的重要环节,也是培养学生科学素质的有效途径。我们在细胞生物学实验教学中,坚持对教学内容、教学方法与手段进行改革,并采取有效的教学设计、教学策略、教学方法和组织策略,形成具有鲜明特色的理论与实验教学体系,促进了高校人才培养和精品课建设。

摘要：为了探讨增强p53、p21基因表达水平和降低c-myc基因表达水平对乳腺癌细胞MCF-7增殖的协同抑制作用,以及这些基因对细胞产生效应时的相互关系,本研究中首先构建了正义的p53、p21和反义的c-myc3种真核细胞表达载体,并根据析因实验设计三种载体不同剂量组合。按照组合用质粒转染细胞,然后对转染细胞的增殖抑制率进行检测,并采用金正均Q值法、单因素方差分析中的LSD法、聚类分析法等统计学方法对结果进行统计分析。结果显示,不同量的p53、p21反义c-myc对MCF-7细胞的增殖均有抑制作用,抑制的程度各基因间存在差异。在各基因组合中,p21与反义c-myc,p53与反义c-myc联用具有协同作用,对MCF-7细胞的增殖产生更强的抑制,而p53与p21之间未显示出协同作用。对三基因协同结果进行聚类分析后,发现第一类组合协同作用最明显,第九类组合的抑制率最高。由此推测,作为抑癌基因的p53或CDK抑制基因p21高表达,同时原癌基因c-myc表达受到抑制,可相互协同显著增强对MCF-7细胞增殖的抑制作用。