摘要：金合欢素(1)是一种选择性高、体内外抗房颤活性良好的黄酮化合物,但水溶性差和半衰期短的缺陷严重限制了其成药。为改善其水溶性、增强口服吸收率,该研究以肠道上的钠-葡萄糖转运蛋白1(SGLT1)为靶点,设计并合成了2个1糖苷前药。Caco-2细胞转运试验结果表明,1糖苷前药的渗透率均比1有显著提高,其转运由SGLT1介导,且受到多药耐药蛋白的外排作用。大鼠药动学研究结果显示,1的单糖前药和二糖前药的c_(max)值分别比1提高5和30倍,AUC相比1分别提升10和100倍,半衰期均延长2 h左右。以上研究结果表明,使用糖基修饰1可有效增强其口服吸收效率。

摘要：目的利用蛋白重组技术和PEG定点修饰技术,制备具有肿瘤微环境双重响应性的智能型蛋白毒素给药系统。方法利用基因重组技术,在天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的C端引入天冬酰胺内肽酶(legumain)的底物天冬酰胺肽段和半胱氨酸残基,将所构建的突变体转化到大肠杆菌中表达目的蛋白并纯化。进一步将重组蛋白末端的半胱氨酸与具有巯基反应性的m PEG-Hz-Mal偶联合成TCS-Asn10-Hz-PEG,采用弱阳离子交换柱纯化TCS-Asn10-Hz-PEG,并在体外考察了TCS-Asn10-Hz-PEG的酸敏感性和酶敏感性。结果成功制备、分离和纯化得到了TCS-Asn10-Cys,完成了m PEG-Hz-Mal与TCS-Asn10-Cys的定点偶联,得到智能型蛋白毒素给药系统TCS-Asn10-Hz-PEG。TCS-Asn10-Hz-PEG在体外p H 5.6的介质中和天冬酰胺内肽酶的作用下,能够水解或酶解释放出TCS,具有酸敏感特性和酶敏感特性。结论本实验设计的蛋白毒素给药系统,具有酸敏感和酶敏感双重响应特性。

摘要：为深入研究褪黑素的分子生物学功能,根据番茄基因组数据库的SlSNAT基因序列信息设计引物,以耐盐番茄材LA1401(PI365967)叶片RNA反转录得到的cDNA为模板,利用高保真酶克隆了番茄的褪黑素合成酶基因SlSNAT,基因CDS(coding sequence)序列全长为768 bp,共编码255个氨基酸。利用酶切连接的方法,构建了该基因的超表达载体。实时定量PCR结果表明,SlSNAT基因在叶片中的表达量最高,显著高于其在花、果实、根、种子和萼片中的表达量。在不同非生物逆境处理下的表达结果显示,在干旱处理条件下的表达量最高,其次是在甘露醇的渗透胁迫逆境,在这2种胁迫条件下的表达量均显著高于其在过氧化氢、氯化钠、低温和褪黑素诱导下的表达量。另外,在盐胁迫条件下,SlSNAT基因在根部的表达量受到明显抑制。