摘要：目的观察cubilinsiRNA真核表达载体对人近端肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cell line,HKC)cubilin基因的特异性抑制作用。方法针对人cubilin基因设计并构建siRNA真核表达载体pSUPER EGFP-C1和pSUPER EGFP-C2,转染HKC,经荧光定量PCR(FQ-PCR)检测cubilin mRNA的表达、不同浓度的人血清白蛋白(HSA)刺激正常HKC及转染重组质粒的HKC24h后cubilin mRNA的表达,并通过激光共聚焦扫描荧光显微镜观察HKC对白蛋白摄取情况的变化。结果FQ-PCR显示HSA刺激正常HKC后cubilin mRNA表达具有剂量依赖性。与正常对照组相比,两个重组质粒均可部分抑制HKC cubilin表达,抑制效率分别为66%和37%,HSA刺激转染pSUPER EGFP-C1、pSU-PER EGFP-C2的HKC后cubiin mRNA水平较正常对照组比较分别下降50%、34%,转染了重组质粒的HKC对白蛋白的摄取明显减少。结论成功地构建了针对人cubilin基因的RNA干扰真核表达载体,表达型siRNA可抑制肾小管上皮细胞cubilin基因的表达及对白蛋白的摄取。

摘要：岩土工程勘察报告应以土力学理论为基石,以技术标准及规范为路标,依据客观、真实的基础资料,研析合理的岩土工程参数,提出恰当的评价及建议。基于岩土工程勘察中的问题,对以下三方面展开讨论:采用标贯法进行液化判别评价应注意计算公式中地面标高选择原地面还是后期整平地面问题,必要时应分不同标高进行评价;浅埋基岩以上地基处理方案如建议嵌岩刚性桩与土共同作用,应明确计算模型为土岩组合地基;应考虑场地的地形条件、区域地质条件及结构设计条件,综合分析确定抗浮设防水位。

摘要：着眼陆军未来作战需求,分析当前发射控制软件存在的弊端,引出新型软件设计方法的必要性;分析新型发射控制软件设计需求,引出VxWorks操作系统,并对其进行了概述;详细描述了该软件设计方案以及可下载模块加载和卸载的软件实现方法。

摘要：本文提出了使用仿真的方法来设计造船生产中的钢料加工自动化车间。利用面向对象的方法,建立加工车间的系统模型,开发模拟钢料加工自动化生产的仿真软件,并对仿真设计方案的生产效率进行了分析和讨论。

摘要：为明确不同栽培模式与密度对芸豆生长发育的影响,试验采用二因素裂区设计,研究3种栽培模式对芸豆农艺性状、产量和干物质积累动态的影响。结果表明:密度为10万株/hm^2时,各栽培模式芸豆的单株荚数最多、单株粒数和单株粒重最高;分枝数与茎粗随密度增加而降低。随着生育进程推进,芸豆茎叶干物质积累量呈先上升后下降的趋势,子粒呈上升趋势。110cm垄作和65cm垄作在密度为25万株/hm^2时产量最高,分别为2 525.25和2 389.23kg/hm^2;平作在密度为20万株/hm^2时产量最高,为2 008.44kg/hm^2。故黑龙江省西部半干旱地区110cm垄作,保苗株数25万株/hm^2时更易获得高产。

摘要：为探讨黑龙江西部半干旱地区小豆高产高效栽培技术措施,采用裂区设计,在平播、65cm垄作、110cm垄作方式下,研究9、13、17、21、25万株/hm^2密度对小豆子粒产量及干物质积累动态的影响。结果表明,不同种植方式的单株荚数和单株粒数均在9万株/hm^2时最高,110和65cm垄作主茎荚数随密度增加呈降低趋势;相同种植方式下,不同密度处理对小豆百粒重的影响较之对其他性状(分枝数除外)稍小,不同种植方式随密度增加小豆茎叶干物质积累量呈现先上升后下降的趋势,小豆荚和子粒干物质积累量随生育进程呈上升趋势。平播和65cm垄作在17万株/hm^2时小豆产量最高,分别为1 387.67和1 723.53kg/hm^2;110cm垄作条件下,21万株/hm^2时小豆产量最高,为1 901.07kg/hm^2;故黑龙江西部半干旱地区110cm垄作,密度21万株/hm^2为小豆适宜种植模式。

摘要：目的开发一种共表达PD-L1高亲和受体PD-1(HAPD1)和嵌合抗原受体(CAR)的新型双效CBNK(HAPD1-CARCBNK)细胞,进一步提高肿瘤免疫治疗的疗效。方法首先构建可同时表达高亲和PD-1(HAPD1)的靶向CD19的CAR的双效慢病毒载体,并包装慢病毒感染从脐血中分离扩增的单个核细胞获得双效脐血CAR-NK细胞。检测分析感染效率、细胞扩增能力、表面标志物表达率;然后通过体外共培养检测细胞在不同效靶比条件下对靶细胞杀伤效率以及不同扩增时期细胞的杀伤效率。最后在免疫缺陷小鼠(24只)体内验证双效CBNK细胞在体内对靶细胞的杀伤能力。结果HAPD1和CAR基因利用慢病毒载体可高效转导至CBNK细胞[(18.63±1.88)%],病毒感染对细胞扩增倍数有一定影响(10.97±2.77 vs 24.84±3.17,P0.05);双效NK细胞在效靶比为5:1和10:1时的靶细胞杀伤效力高于普通CARCBNK细胞[(68.38±8.08)%,(79.11±7.42)%vs(49.65±13.60)%,(59.78±9.32)%,P<0.05]。病毒感染后第9~12天双效NK细胞具有最强靶细胞杀伤能力。体内实验进一步证实,双效NK细胞移植28 d后动物白细胞中肿瘤细胞比例低于普通CAR-CBNK细胞移植组[(19.21±3.07)%vs(29.08±3.15)%,P<0.05]。结论本研究成功构建了一种共表达HAPD1和CAR双效CBNK细胞,并在体外和体内实验证实其高效的靶细胞杀伤能力,为肿瘤免疫细胞治疗提供了一个新的有效方案。