摘要：目的:构建重组RPLP0蛋白的原核表达载体并诱导表达,对表达产物进行纯化鉴定及评价。方法:设计重组RPLP0蛋白基因,经PCR扩增获得目的基因;在其5′和3′端引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点,构建pET41a-GST-RPLP0-6*His融合基因表达载体;对该质粒载体进行酶切鉴定和测序验证,将鉴定正确的重组质粒载体转化至大肠杆菌并以IPTG诱导表达;经过尿素溶液纯化及复性以后得到复性的重组RPLP0蛋白;采用Western blot分析重组RPLP0蛋白的免疫原性;采用ELISA法对其抗体结合性、特异性进行分析。结果:酶切及测序结果显示,本实验成功克隆出重组RPLP0蛋白基因,将获得的目的基因构建至原核表达载体pET41a,经IPTG诱导后成功表达目的蛋白。SDS-PAGE电泳结果显示重组RPLP0蛋白为包涵体表达蛋白,分子量约为61 kD。Western blot检测显示重组RPLP0蛋白具有完全的免疫原性;ELISA检测显示重组RPLP0蛋白具有良好的抗体结合性和特异性。结论:表达、鉴定并分析了重组RPLP0蛋白,为深入研究RPLP0蛋白的功能及应用奠定基础。

摘要：文章以攀枝花市某污水厂改造设计为例,重点探讨了总承包模式下污水厂改造设计的实践与应用。通过分析该工程设计过程中的制约因素,提出相应解决方案,总结出总承包模式下的污水厂改造设计与传统模式下污水厂改造设计的主要区别:以设计为主导。污水处理行业具有一定的特殊性和复杂性,总承包模式在污水处理工程中的应用,对于设计方案的优化、设计制约因素的解决、工程项目整体质量与进度的提升、组织结构和资源配置的优化等均具有实际意义,可实现设计院与业主的共赢。