摘要：背景:目前常用的加强股骨头力学结构的植骨方法防止塌陷的作用有限,结果并不能完全令人满意。目的:探讨髓芯减压术后利用同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质植入强化股骨头力学结构,治疗股骨头坏死的可行性。设计、时间及地点:随机对照动物实验于2005-10/2006-07在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。临床病例分析于2001-01/2005-04在协和医院骨科完成。材料:羊、人同种异体骨支撑架由中国辐射防护研究院山西医用组织库加工制作完成。20只成年雄性大尾羊行双侧股骨头坏死造模。参试者:早中期股骨头坏死患者23例24髋,排除FicatIV期及III期关节面受累范围>15%的患者。方法:①动物实验:18只模型羊随机分为3组,单纯髓芯减压组行坏死股骨头髓芯减压,自体松质骨和脱钙骨基质植入组在行髓芯减压后植入自体松质骨和脱钙骨基质,同种异体骨支撑架植入组在行髓芯减压后植入同种异体骨支撑架、自体松质骨和脱钙骨基质。②临床观察:23例患者均采用同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质治疗。主要观察指标:①动物实验:术后5,10和20周对股骨头行影像学、组织学观察和生物力学测定。②临床观察:随访手术前后Harris评分变化、X射线影像学进展。结果:①动物实验结果:影像学和组织学检查显示同种异体骨支撑架植入组在髓芯减压区骨缺损修复及成骨方面较自体松质骨和脱钙骨基质植入组略高,此两组都较同时期的单纯髓芯减压组明显增强(P18个月,Harris评分术前优良率为43.5%,术后优良率为91.3%。22侧髋关节影像学表现保持稳定,无明显并发症发生。结论:应用同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质治疗股骨头坏死,能有效加强股骨头的力学结构,促进坏死骨的修复,防止股骨头关节面的塌陷。

摘要：背景:目前用于组织工程韧带的支架材料胶原蛋白、聚乳酸、聚羟基乙酸、小肠黏膜下层、聚糖及纳米材料等均有降解速度快的特点,应用于宿主后有一定炎症反应。目的:观察蚕丝支架的机械强度和体外降解性,以及与巨噬细胞的反应。设计:对照观察。单位:实验于2004-09/2005-01在华中科技大学附属协和医院骨科完成。材料:市售白色家蚕蚕丝(20/22D),每30根蚕丝平行排列为一束支架,置入煮沸的5g/LNa2CO3中进行脱胶,Na2CO3溶液体积(mL)与生丝的质量(g)之比为1000。方法:①体外降解实验:8cm长蚕丝支架干燥后测初质量,然后分别浸泡于磷酸盐缓冲液和用磷酸盐缓冲液配制的1.0g/L胶原酶中,浸泡12周后测试蚕丝支架残质量,计算失质量率。同时进行拉伸试验,测量样品的极限抗拉强度。②单核细胞株RAW264.7的培养:将丝状支架组、对照组、脂多糖组均加入2×108L-1巨噬细胞混悬液1mL中培养,培养第1,7天收集各组细胞培养上清,采用ELISA方法测定TNF-α含量。主要观察指标:①丝状支架在磷酸盐缓冲液和胶原酶中失重率和极限抗拉强度变化。②培养第1,7天各组细胞培养上清中TNF-α含量。结果:①丝状支架在胶原酶中8周后质量减少已超过50%,在磷酸盐缓冲液中未见明显改变。②胶原酶消化8周后丝状支架的极限抗拉强度下降超过原来的50%,在磷酸盐缓冲液中未见明显变化。③培养第1,7天丝状支架组巨噬细胞分泌少量TNF-α,脂多糖组上清中的TNF-α水平明显高于丝状支架组(P0.05)。结论:丝状支架经12周降解后仍保持良好机械特性,培养第1,7天与巨噬细胞混合培养中,巨噬细胞对该材料具有免疫惰性。

摘要：目的 :探讨胸腰段椎弓根螺钉入钉点的选定方法。方法 :1 996年～ 2 0 0 1年通过测量胸腰椎标准前后位X线片上椎弓根椭圆形投影的中心点与上一椎同侧下关节突下极及外侧缘的相互位置关系 ,以该下关节突为参照物 ,个体化选定椎弓根螺钉入钉点 ,临床应用 42例。结果 :所有病例术后拍X线片复查 ,椎弓根螺钉置入位置良好 ,骨折椎体恢复正常高度 ,椎体滑脱得以复位。结论 :根据胸腰段脊柱标准前后位X线片上椎弓根与同侧上一椎下关节突投影的相互位置关系 ,以该下关节突为参照物 ,动态选定椎弓根螺钉入钉点 ,是一个良好的方法。

摘要：目的构建单启动子非融合表达载体pIRES-p53-p14^(ARF)并观察其对骨肉瘤细胞增殖生长的影响及其功能初探。方法将p53与p14^(ARF)全长cDNA编码区依次亚克隆至pIRES载体中,并通过PCR、酶切鉴定重组质粒。用Lipofectamin 2000将野生型pIRES-p53-p14^(ARF)真核表达载体转染MG-63细胞,48h后采用axiovent200型倒置显微镜、荧光免疫细胞化学,观察其在细胞内的表达并初步探究其抑瘤功能。结果成功构建出含p53与p14^(ARF)全长基因片段的单启动子非融合表达载体pIRES-p53-p14^(ARF)。RT-PCR,酶切鉴定质粒大小、位点均符合实验设计。荧光免疫细胞化学检测显示p53阳性细胞同时也表现为p14^(ARF)免疫反应阳性,转染后瘤细胞可见散在凋亡现象。结论pIRES-p53-p14^(ARF)非融合表达载体的构建与真核细胞导入、目的基因表达成功。