摘要：以不吸水链霉菌武夷变种CK-15为材料，提取基因组DNA，经Sau3AI部分酶切后回收35—40kb之间的片段。连接到pCC1FOS载体上，经过包装转染涂布后构建得到了CK-15基因组的Fosmid文库，文库的滴度为8．8×10^5CFU／mL。随机挑取16个阳性克隆，经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切电泳分析，样品插入片段平均长度大于35kh，插入率为100％，符合构建文库的要求。根据多氧霉素、尼克霉素生物合成基因及大环内酯类聚酮合成酶基因（PKS）设计特异性引物，以基因组为模板进行PCR扩增，筛选特异性引物探针。结果用大环内酯类聚酮合成酶基因设计引物扩增出1693bp的片段经Blast比对其与大环内酯类抗生素生物合成基因相似性为95％以上。武夷菌素产生菌CK-15 Fosmid文库的构建及文库探针的获得，为武夷菌素生物合成基因的克隆奠定了基础。

摘要：武夷菌素是由不吸水链霉菌武夷变种(Streptomyces ahygros ***)产生的一种农用抗生素,对多种作物的真菌病害防治效果显著。为进一步提高武夷菌素产生菌的产量、降低其生产成本,应用SAS软件提供的Plackett-Burman设计法和响应面分析法对该菌株的发酵培养基进行优化组合,以期找到适宜武夷菌素产生菌C-75生产的最佳发酵培养基配方。应用Plackett-Burman设计法从9种培养基成分中筛选出玉米粉和碳酸钙为两个重要因素;通过响应面回归分析结果建立响应面回归模型:Y=5826.99-91.56X2-180.69X8-194.31X22-151.25X2X8-205.31X82。回归模型预测当玉米粉和碳酸钙的含量分别为2.314g和0.205g(50mL培养基装量)时,该模型能取到最大值。摇瓶发酵试验结果表明,该模型稳定点处的实际效价平均值为5837μg/mL,菌株C-75经优化培养基发酵后的效价较之前提高了5.59%。

摘要：不吸水链霉菌武夷变种Streptomyces ahygroscopicus *** CK-15是从福建省武夷山土样中分离得到的一株链霉菌,其代谢产物武夷菌素对果蔬真菌病害具有良好的防治效果,但是因其产量低的缺点限制了武夷菌素工业化生产和农业生产中的应用。为了实现利用基因工程培育高产新菌株的目标,首先要获得武夷菌素的生物合成基因。根据大环内酯类抗生素聚酮合成酶基因设计引物筛选菌株CK-15的基因组文库,共获得9个阳性克隆。克隆和测序获得3个较长scaffold片段,序列总长度达53.291 kb,其中包含了14个可能阅读框,通过同源比对证实该序列与*** ATCC 11455的制霉素生物合成基因有很高的同源性。本研究为进一步研究武夷菌素生物合成基因的功能,并通过基因工程培育高产新菌株奠定了基础。