摘要：为建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）疫苗免疫后在猪体内病毒血症持续时间的方法。根据GenBank中PRRSV基因序列,设计1对针对N基因扩增的特异性引物,经RT-PCR扩增后连接到pMD19-T载体上,构建含有N基因片段的重组质粒。采用SYBR GreenⅠ染料法进行荧光定量RT-PCR扩增,建立标准曲线并进行特异性、敏感性及重复性试验,比较分析该方法与商品化试剂盒检测结果的阳性符合率。结果显示,所构建方法的扩增效率为1.063,标准品各稀释度质粒拷贝数与Ct值之间相关系数为0.999,引物特异性强,可检测的最低核酸模板浓度为1.0×10~2copies/L,比常规PCR敏感性高10倍,重复性试验的变异系数均小于1%,与商品化试剂盒检测的阳性符合率达100%。两种方法检测结果均表明,在猪体内PRRSV疫苗病毒血症可持续3周。本研究建立的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR具有快速、特异、敏感和重复性好等优点,可为PRRSV感染（包括疫苗毒）的调查、监测和防控提供可行性和操作性强的技术支持。

摘要：1实验室研究本研究对猪I型PRRS活疫苗(MLV)免疫接种和MLV与灭活疫苗(KV)的组合免疫接种的免疫应答进行了比较.实验设计如下(如表1),将32头小猪随机分成4组,每组8头.A组、B组、C组各组猪于1.5月龄时注射I型PRRS弱毒疫苗,D组为不注射疫苗的对照组.在猪4.5月龄时,A组注射第2次I型PRRS弱毒疫苗,B组和C组注射I型PRRS灭活疫苗(PROGRESSIS,法国Marial公司生产,2 mL,肌肉注射).在猪5.5月龄时,C组再注射一次同型同剂量的灭活苗.在猪6.5月龄时,用I型PRRSV 2749毒株鼻内接种(与欧洲型LELYSTED同源性为99%)对32只猪攻毒,剂量为2 mL 106TCID50病毒培养液.检测各组免疫后ELISA抗体,中和抗体(NA)和细胞免疫(CMI)水平,并在攻毒后测定病毒血症.