摘要：NPC2蛋白是一种小分子的溶酶体蛋白,具有水溶性。在脊椎动物中,NPC2蛋白与胆固醇和脂质的结合和运输有关;在节肢动物中参与多种信息化学物质的结合和识别。为了进一步探究蜱体内NPC2蛋白的分子特性,本研究以长角血蜱为研究对象,对HL-NPC2基因进行了克隆和序列分析,构建了原核表达载体,表达后制备出鼠源多克隆抗体,同时利用实时荧光定量qPCR技术对NPC2在蜱的不同生长阶段及不同组织进行分析,后续做了嗅觉相关性试验。结果显示:HL-NPC2蛋白的ORF为468 bp,编码155个氨基酸;NPC2蛋白在长角血蜱体内以多聚体形式存在,在长角血蜱各个生长阶段和不同吸血阶段的各个组织中都有表达;嗅觉相关性试验表明NPC2蛋白可能与长角血蜱嗅觉相关。本次研究可为该蛋白的后续研究及新的基于嗅觉的蜱控制策略的设计提供理论基础。

摘要：为了解新疆南疆牛隐孢子虫病的感染情况,从而为该病的防控提供理论依据,以新疆南疆某牛场牛粪中的隐孢子虫卵囊DNA为模板,根据隐孢子虫18S rRNA序列设计引物,采用巢式PCR方法鉴定了自然感染的新疆南疆牛源隐孢子虫,并对扩增出的目的片段进行了测序、同源性分析,并运用MEGA 5.0软件构建系统发育进化树。结果表明:检测材料能够扩增出目的片段;新疆南疆牛源隐孢子虫分离株的18S rRNA与广州微小隐孢子虫的同源性达100%,种系发育亲缘关系最近,处于同一分支,与宁夏、河南、黑龙江等地微小隐孢子虫的同源性达99%。说明新疆南疆牛源隐孢子虫分离株在种属上为微小隐孢子虫。

摘要：采用平板凝集试验、试管凝集试验对采自新疆3个集约化养殖鹿场、1个散养鹿群的410份血清样本进行布氏杆菌特异性抗体检测;采用分子生物学方法,根据Gen Bank公布的布氏杆菌外膜蛋白Omp25c的基因序列设计特异性引物,对疑似布氏杆菌阳性的10份羊水病料进行PCR扩增,并将扩增产物克隆到p GEM-T Easy Vector进行测序。结果表明,血清稀释比例为1∶25时,平板凝集试验、试管凝集试验的抗体阳性率分别为15.1%、14.6%,4份羊水样本的PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上均观察到预期149 bp大小的扩增条带,BLAST比对分析显示该扩增序列与布氏杆菌基因组的核苷酸序列同源性为100%,从而判定新疆集约化养殖的天山马鹿存在布氏杆菌病的感染。

摘要：为了获得羊痘病毒γ干扰素受体(interferon-γreceptor,γ-IFNR)基因,用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计γ-IFNR基因特异性引物并进行PCR扩增,将其产物克隆至pGEM-T Easy载体,并进行了测序和序列分析。电泳结果显示,扩增出了2 600 bp左右的DNA片段;测序结果表明,成功克隆了γ-IFNR基因,其大小828 bp,基因内存在一个PmeⅠ单一酶切位点,在编码区有早期转录终止信号TTTTTN(T)T;核苷酸和氨基酸同源性分析表明,弱毒疫苗株G14-STV44-55γ-IFNR基因与基因BANK中发表的8个参考毒株的同源性在92%和89%以上,说明羊痘病毒γ-IFNR基因具有较高的保守性。

摘要：目的:对2004年发表的第一版《拯救严重脓毒症与感染性休克治疗指南》进行修订。设计:55位国际专家通过分组、远程电话、电子邮件以及全体大会等方式进行讨论,最后统一意见对Delphi方法进行了修改。这个过程是在没有任何企业资助的前提下进行的。方法:应用等级分级系统对证据进行评价,分从高级别的A级到低级别的D级共四个等级,并且以此决定建议的力度。给出的强烈建议表示该项治疗干预措施产生的作用效果显著的超过其可能产生的副作用(比如风险,负担,费用),或者就根本没有这些副作用。给出的次强建议表示该项治疗干预措施产生的作用效果与可能产生的副作用二者比较尚不明确。强级或者次强级的等级划分更重要的是考虑临床的重要性而不是简单的不同等级字母代表的证据质量。在没有达成一致意见方面,有一个正式解决该问题的途径。建议分为三个部分,包括:直接针对严重脓毒症患者建议;适用高度怀疑为严重脓毒症的危重病患者建议;小儿脓毒症患者建议。结果:重要的建议包括:患者确诊感染性休克后第一个6小时内的早期目标复苏(1C);应用抗生素之前应该进行血培养(1C);快速进行影像学检查以明确潜在的感染病灶(1C);在诊断为感染性休克后的1小时之内应用广谱抗生素进行治疗(1B),在诊断为严重脓毒症而没有发生感染性休克后的1小时之内应用广谱抗生素进行治疗(1D);在适当时机,在临床以及微生物学的指导下重新选择应用窄谱覆盖致病菌的抗生素(1C);抗生素应用7～10天后进行临床疗效判断(1D);感染源控制需要综合考虑所选择方法的利弊(1C);选择使用晶体或者胶体液进行复苏(1B);为了恢复循环的平均灌注压进行液体负荷治疗(1C);在增加了灌注压的同时而不能改善组织灌注的情况下应当减少液体的输入(1D);在维持平均动脉血压目标≥65mmHg使用血管加压素要优先于去甲肾上腺素与多巴胺(1C);在已经予以液体复苏以及应用了血管收缩药物的前提下,如果心输出量仍然偏低,应用多巴酚丁胺(1C);感染性休克如果经过积极的液体复苏以及应用了血管加压素治疗后,血压仍然难以达到理想水平,应用糖皮质激素(2C);严重脓毒症患者经过临床评价后有较高的死亡风险,应用重组活化蛋白C(2B,但是对于手术后患者为2C);如果没有组织的低灌注,冠状动脉疾病以及急性出血的情况,血红蛋白维持在7～9g/dL(1B);对ALI以及ARDS患者采取小潮气量(1B)以及限制吸气平台压(1C)的通气策略;对于急性肺损伤的患者,至少需要应用一个最小量的呼气末正压水平(1C);除非有禁忌证存在,进行机械通气的患者床头端需要抬高(1B);对于ALI/ARDS的患者应当避免常规应用肺动脉漂浮导管(1A);对已经诊断明确的ALI/ARDS患者在没有发生休克的情况下,为了降低机械通气以及入住ICU的天数,应当采取限制液体的保守策略(1C);建议应用镇静/镇痛治疗(1B);镇静治疗可以选择使用间断的弹丸式以及持续的静脉输入两种方式(1B);如果可能,应当完全避免应用神经肌肉阻滞药物(1B);应当强化患者血糖管理(1B),患者病情一旦稳定以后应当将患者目标血糖控制在<150mg/dL(2C);持续静脉-静脉血液滤过或者血液透析效果相等(2B);预防深静脉血栓的形成(1A);应激性溃疡可以应用H2阻滞剂来预防上消化道出血(1A),也可以应用质子泵抑制剂(1B)。关于小儿脓毒症建议等级(略)。