摘要：目的:优化活血定痛凝胶贴膏的提取工艺。方法:采用熵权法结合Box-Behnken响应曲面设计法,以羟基红花黄色素A、山柰酚、浸出物三项指标的提取率进行综合评分,考察乙醇体积分数、溶剂倍数、滴速3个影响因素,优化活血定痛凝胶贴膏的乙醇提取工艺。结果:最优提取工艺为:乙醇体积分数60%,溶剂倍数为10倍量,滴速2 mL/min,在此工艺条件下,其指标成分羟基红花黄色素A、山柰素、浸出物提取率分别为2.502%、0.118%、21.313%,综合评分为7.546,RSD值1.90%。结论:采用熵权法结合Box-Behnken响应曲面设计法优化的乙醇提取工艺稳定、可行,可用于活血定痛凝胶贴膏的进一步开发利用。

摘要：以昆明小鼠(Mus musculus)为材料,利用超数排卵获得小鼠扩展囊胚、孵化囊胚。为了研究小鼠胚胎干细胞(Mouse Embryonic Stem Cells,mESC)分离和传代的影响因素,设计两个实验:(1)不同孕期(3.5 d或4.5 d)的囊胚对胚胎干细胞分离效率的影响;(2)第5代后,不同传代方法(机械法或酶消化法)对mESC传代的影响。结果显示:在3.5 d孕期时,胚胎为扩展囊胚,在4.5 d时为孵化囊胚,扩展囊胚在贴壁率、原代克隆形成率差异不显著,从在继代培养上显著高于孵化囊胚(P<0.05);第5代后用机械法或胰酶消化法传代对mESC的维持没有明显差别,但从克隆的形态上看,酶消化法优于机械法。最后,本研究从扩展囊胚组中成功获得了一株mESC,该mESC碱性磷酸酶染色呈强阳性,经RT-PCR分析显示表达Oct4、Sox2,核型为正常40XY。