摘要：联合注浆法是一种将灌注浆法和高压旋喷注浆进行结合施工的注浆方法,两者之间工艺相近,工序相衔接,将极大提高纠偏加固效率;本文结合实例和工艺原理,对联合注浆法设计与施工的要点、难点进行了详细分析论述,对其纠偏和加固效果进行了科学评价。

摘要：该研究建立了基于CRISPR-Cas13a系统的斑马鱼基因表达下调体系,并对其效果和特异性进行了检测分析。以斑马鱼报告基因egfp和内源性基因ta、fabp11a为研究对象,设计并合成靶向靶标基因的crRNA及其突变体,构建Cas13a及其突变体(dCas13a)的表达质粒,在体外合成Cas13a-mRNA和dCas13a-mRNA(dCas13a),分别与各crRNA共注射至野生型AB和egfp转基因斑马鱼胚胎中,通过表型观察及qRT-PCR技术验证靶标基因表达下调的情况。结果表明,Cas13a-mRNA分别与egfp-crRNA、ta-crRNA和fabp11a-crRNA共注射后,可相应导致斑马鱼体内绿色荧光蛋白减少、尾部发育缺陷以及眼睛发育缺陷等表型;qRT-PCR结果显示,注射Cas13a-mRNA和各靶基因crRNA后egfp、ta和fabp11a表达均下调;而用含有序列突变的Cas13a或者crRNA注射后,CRISPR-Cas13a系统无法下调靶基因表达。该研究表明CRISPR-Cas13a系统可有效下调斑马鱼体内基因的表达。