摘要：目的探讨注射用丹参总酚酸(冻干)(SLI)对人CYP450酶和P-糖蛋白体外抑制作用以及对大鼠CYP1A2和CYP3A体内诱导作用。方法①应用P450-GloTMCYP450检测试剂盒,通过化学发光法测定SLI和经典抑制剂对细胞色素P4501A2(CYP1A2),CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9的IC50值,通过比较SLI和经典抑制剂对相应细胞色素P450亚型的IC50值来判断SLI对人CYP450酶的体外抑制作用。②Wistar大鼠分别iv给予SLI 3,10和30 mg·kg-1和诱导剂苯巴比妥钠20 mg·kg-1,采用探针底物法,通过比较代谢产物的生成速率来评价SLI对大鼠CYP1A2和CYP3A的诱导作用。③应用ATP酶检测试剂盒,通过化学发光法测定ATP酶活性来评价SLI是否为P-gp的底物或抑制剂。结果①CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4抑制剂的IC50与SLI对其的IC50进行比较(CYP1A2:0.12μmol·L-1vs 840μmol·L-1;CYP2C9:3.362μmol·L-1vs 704μmol·L-1;CYP2C19:3.236μmol·L-1vs 306μmol·L-1;CYP2D6:0.117μmol·L-1vs 2660μmol·L-1;CYP3A4:0.078μmol·L-1vs 1780μmol·L-1)。②与空白对照组(86.4±6.3)nmol·***-1相比,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP1A2活性分别为83.4±6.6,82.5±4.0和(83.4±6.6)nmol·***-1。与空白对照组(16.1±0.9)nmol·***-1比较,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP3A活性分别为15.7±0.6,15.9±0.7和(15.9±1.0)nmol·***-1,无显著性差异。③以临床血药浓度为依据设计的一系列浓度的SLI 0.0002,0.0006,0.002,0.006,0.017,0.052,0.156和0.468 g.L-1的ATP酶活性分别与空白对照组进行比较(5.8,5.3,5.8,5.5,5.8,5.2,,5.8,5.3,vs 5.75μmol·***-1),无显著性差异。结论SLI临床给药剂量既不能体外抑制人CYP1A2,CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9酶活性,也不能诱导大鼠CYP1A2和CYP3A,同时也不是P-gp的体外抑制剂或底物。

摘要：采用Box-Behnken中心组合设计,在提取实验中,以乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度为自变量,叉分蓼总黄酮(total flavonoids extracts of Polygonum divaricatum L.,TFP)得率为因变量,分析自变量对因变量的影响。在纯化实验中,考察了三种大孔树脂对TFP的吸附和解析能力,再以上样液pH、上样量、洗脱液体积分数、洗脱速度为自变量,TFP纯度为因变量,优化纯化工艺。并通过测定TFP清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O^(2-)·)和羟自由基(·OH)的能力研究其体外抗氧化活性。通过实验数据分析,较佳提取工艺为:乙醇浓度69%,料液比1∶10,提取时间2.2h,提取温度74℃,TFP得率为2.42±0.05mg/g;纯化工艺最终确定上样液pH为5、上样量22mL、洗脱液体积分数65%、洗脱速度2 mL/min为较优纯化工艺,TFP纯度为39.88±0.19%。实测值与模型理论预测值相比较,P <0.05,说明该模型回归性良好,试验的拟合程度高。且TFP具有较好的抗氧化能力,其清除DPPH、O^(2-)·、·OH的半抑制质量浓度(IC_(50))分别为63.35、109.00、87.79μg/mL。