摘要：目的:探讨应用RT PCR技术检测CK19 mRNA的优化方法。方法:采用RT PCR方法分别检测经病理确诊的胃癌组织及有明确肿瘤病灶的胃癌患者和健康对照者外周血中CK19 mRNA的表达。结果:通过设计多对引物进行对比及设立未经逆转录的RNA为模板的对照可观察到CK19假基因及基因组DNA的干扰现象。在合理设计错配引物的基础上选择合适的退火温度可消除干扰。结论:在运用RT PCR法检测外周血中CK19 mRNA表达时常存在基因组及假基因等因素的干扰,通过本方法可有效地克服这种干扰作用。

摘要：目的探讨主要组织相容性复合体（MHC）Ⅱ类基因在多器官功能障碍综合征（MODS）中的表达及意义。方法建立二次打击猪MODS模型。18只雄性家猪随机分为实验组（M组）和正常对照组（C组）每组9只。M组给予失血性休克、再灌注损伤、内毒素血症复合因素；C组仅进行麻醉和动静脉插管。观察7d后处死动物，取脾组织用Trizol法提取总RNA。设计SLA—DQA（猪MHCⅡ类基因）引物序列，逆转录构建cDNA，用实时荧光定量PCR（Real Time FQ—PCR）检测SLA—DQA mRNA的表达量。UVP计算机图像分析系统绘出标准曲线。结果M组动物死亡率为7／9，有8例发生MODS，发生率为8／9。C组SLA—DQAmRNA拷贝数为（1．376±1．006）×10^3，M组拷贝数为（1．376±1．006）×10^3，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论MODS模型复制满意。MHCⅡ类基因在MODS中表达下降，可能与逆转录因子（CIITA）的调控和TNF—α、IL-10等多种细胞因子的释放有关。

摘要：目的系统评价单孔腹腔镜与非单孔腹腔镜胆囊切除术安全性及有效性。方法计算机检索Pubmed和万方数据库中有关单孔腹腔镜与非单孔腹腔镜胆囊切除术的随机对照实验(RCT)文献,依据Cochrane评价手册评价偏倚风险,并提交手术时间、术后疼痛评分、术后并发症发生率及术后美容评分等的相关数据进行荟萃分析。结果纳入4篇RCT文献,共236例患者。荟萃分析结果显示相比非单孔腹腔镜胆囊切除术,单孔腹腔镜技术不会显著性影响手术并发症的发生(OR 1.47;95%CI 0.73～2.97;P=0.28),且具有更高的术后美容评分(SMD 0.70;95%CI 0.40～0.99;P<0.00 001)。结论单孔腹腔镜胆囊切除术具有更好的美容效果和一定的安全性。但评价该术式和非单孔腹腔镜胆囊切除术在其他发面的优劣势,仍需要更多设计严谨和大样本的随机对照研究。