摘要：【目的】评价外侧入路三层面法在盆腔淋巴清扫中的有效性及安全性。【方法】2016年9月至2017年12月,7例膀胱癌、4例高危前列腺癌及1例阴茎癌伴淋巴转移者,在行肿瘤根治时,按设计行外侧入路三层面法盆腔淋巴清扫术,分析基本资料、围手术期并发症、病理结果及生存状况。【结果】患者平均年龄为60.5(49~75)岁,手术均顺利完成,无改开放病例。平均手术时间为52(36~79)min,均出血量为45(25~110)mL。术后30 d内并发症ClavienⅠ-Ⅱ级8例,Ⅲ-Ⅴ级2例。平均清扫淋巴结18.5个,25.0%患者淋巴结阳性。【结论】外侧入路三层面法盆腔淋巴清扫术解剖清晰,安全可行,尤其对于肥胖患者更为合适,近期肿瘤控制良好,远期疗效有待更长期的大样本研究。

摘要：背景:重组腺病毒质粒的构建是重组腺病毒制备过程中的中枢环节,传统的细胞内同源重组法步骤多、成功率低、实验周期长。目的:构建含有大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的重组复制缺陷型腺病毒***-10,为真核表达及其动物模型的研究提供实验基础。设计、时间及地点:开放性实验,于2005-07/2006-04在中山大学附属第一医院完成。材料:SD大鼠1只。AdEasy系统由美国JohnHopkins肿瘤研究中心惠赠。ThermoscriptTMRTkit和Trizol为Invitrogen产品;HEK-293保存于中山大学动物实验中心细胞库;克隆大鼠白细胞介素10基因引物合成及测序由上海博亚生物技术有限公司完成。方法:采用反转录聚合酶链反应的方法从健康SD大鼠脾脏新鲜组织中提取的总RNA中克隆rIL-10基因,采用AdEasy-1腺病毒载体系统经***5183细菌内同源重组及HEK-293包装而获得重组腺病毒***-10。主要观察指标:用Westernblot和RT-PCR的方法鉴定***-10并进行滴度测定。结果:自健康SD大鼠脾脏组织中克隆rIL-10基因,构建出重组腺病毒***-10。经PCR扩增、酶切鉴定、DNA测序最终确定插入序列为rIL-10,Westernblot和RT-PCR均检测出细胞内rIL-10基因及其蛋白表达。再通过扩增、纯化后获得滴度为1.0×1014pfu/mL的重组腺病毒。结论:采用AdEasy-1系统,经细菌内同源重组及HEK-293细胞包装、扩增,纯化后获得足够数量和质量的病毒,方法简便易行,结果稳定可靠。

摘要：目的 探讨SHANK蛋白RH区域交互作用蛋白（SHARPIN）对前列腺癌细胞凋亡调控机制.方法 设计并合成抑制SHARPIN的小干扰RNA 3对,实时荧光定量聚合酶链反应法（FQ-PCR）筛选抑制效率最高者;Western blot验证对前列腺癌细胞中SHARPIN表达的抑制效果.Western blot检测各组中SHARPIN、生存素（Survivin）表达和核转录因子-κB（NF-κB）磷酸化情况;四唑氮化合物（MTS）法检测增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 FQ-PCR显示第3对序列对SHARPIN抑制效率最高;Western blot检测显示其对3个前列腺癌细胞株中SHARPIN表达抑制效率均达70％以上.当SHARPIN被抑制后,p65的激活明显受抑,15 min时对p-p65抑制率达95.0％;Survivin的表达比对照组明显下调,加入NF-κB抑制剂后,Survivn表达量虽然也明显下降,但是远没有抑制SHARPIN后表达量下降的明显.抑制SHARPIN后,LNCap、DU145和PC-3的增殖抑制率分别为31.0％、56.8％和54.6％.抑制SHARPIN后,3种前列腺癌细胞早期凋亡明显增加.结论 SHARPIN可以通过NF-κB通路抑制前列腺癌细胞凋亡;Survivin可能是其并不唯一的下游调控因子.

摘要：目的评价标准化设计进行腹腔镜膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术的安全性和有效性。方法2014年7月至2016年10月，安徽医科大学第二附属医院的34例(其中男性32例、女性2例)膀胱癌患者按标准化流程接受腹腔镜膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术，收集并分析患者的基本资料、围手术期结果、术后并发症、病理结果及生存状况。结果患者平均年龄65.5岁(48～79岁),所有患者手术均顺利完成，无中转开放手术及添加套管患者。平均手术时间352 min(295～436 min),平均出血量112 ml(50～350 ml)。术后30 d内并发症：Clavien Ⅰ-Ⅱ级12例，Clavien Ⅲ-Ⅴ级4例。平均清扫淋巴结14.5枚，16.7%患者淋巴结阳性。术后病理显示：3例T1N0G3，6例T2aN0, 11例T2bN0, 2例T2bN1, 5例T3aN0，4例T3aN1，3例T3bN0，手术切缘均为阴性。患者对术后外观满意。中位随访时间为24个月(2～48个月)，其中1例患者术后因肠梗阻转入普外科，无局部复发患者，2例患者于术后12、15个月发现远处转移行化疗，患者均健在。术后6个月，患者白天均能达到良好控尿，其中6例患者夜间不能自主控尿。结论标准化流程腹腔镜膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱技术可行，近期肿瘤根治效果良好，远期疗效及肿瘤控制效果仍有待更长期的大样本研究。