摘要：目的:设计和合成针对抗肝纤维化关键基因结缔组织生长因子(connective tissue growthfactor,CTGF)的特异性小干扰RNA(siRNA),并筛选高效的CTGFsiRNA抗肝纤维化序列,探讨其通过尾静脉注射是否具有抗大鼠肝纤维化作用。方法:①筛选高效的CTGF siRNA序列。②干预肝纤维化模型大鼠。选取雄性SD大鼠30只,随机分成5组,分别为空白对照组尾静脉注射生理盐水8周;模型组腹腔注射40%CCl4(3 ml/kg)及尾静脉注射生理盐水,1次/3d,连续8周;预防组腹腔注射40%CCl4及尾静脉注射CTGF siRNA(0.1 mg/kg),1次/3 d,连续8周;2周治疗组腹腔注射40%CCl42周,后给予CTGF siRNA及CCl4 6周;4周治疗组腹腔注射40%CCl4 4周,后给予CTGFsiRNA及CCl4 4周。于最后一次CCl4注射3天后取血及组织标本,检测肝纤维化指标,应用Real-Time PCR及Western印迹法检测CTGF mRNA及蛋白质在大鼠肝组织表达,应用Masson染色检测肝组织纤维化。结果:与模型组(0.544±0.019)相比,预防组(0.105±0.003)及治疗组(0.190±0.006)大鼠肝组织CTGF mRNA和蛋白质表达显著下调(P<0.05),肝组织炎症和坏死及纤维化明显减轻,肝纤维化指标显著降低(P<0.05)。4周治疗组与模型组相比各指标降低,与预防组及2周治疗组相比各指标相对升高(P<0.05)。结论:成功筛选出高效的CTGF siRNA,且经尾静脉注射CTGF siRNA能显著抑制大鼠体内肝脏CTGF基因表达,并能有效防治大鼠肝纤维化,对于病程较长的肝纤维化也有一定的治疗作用,提示CTGF siRNA在抗肝纤维化治疗中有重要作用。

摘要：本文通过对建筑工程高大模板钢管支撑体系坍塌事故原因的分析,阐述了超高、大跨度、大截面构件模板支撑体系,采用扣件式钢管支撑的设计、施工和监理的要点。从模板专项施工方案的编制、审查以及对支撑体系施工质量的管理与控制及砼浇筑应注意的事项,强调支撑体系设计与施工实际的有效结合,从支撑体系设计的源头到实施过程整体搭设质量的控制,以达到支撑体系整体的稳定、有效和安全。

摘要：目的 设计和合成针对抗肝纤维化关键基因抗结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）的特异性小干扰RNA（siRNA）,并筛选高效的CTGF siRNA抗肝纤维化序列.方法 参照siRNA设计原则,应用RNA在线设计软件,设计3段RNA干扰候选序列,分别转染正常干细胞株（L-02）,以转染非特异性siRNA（与CTGF mRNA无同源性）作为对照,应用Western 印迹检测L-02细胞CTGF蛋白质表达.结果 与对照相比,转染siRNA的L-02细胞CTGF蛋白表达明显下调,且siCTGF-1、siCTGF-2、siCTGF-3各片段干扰率分别为44.91 %、93.99 %、81.34%,其中以siCTGF-2干扰率最高,效果最明显.转染非特异性siRNA的L-02细胞CTGF蛋白表达无明显变化（P＜0.05）.结论 不同的CTGF siRNA对L-02细胞CTGF表达水平具有不同的干扰效能,成功合成能高效阻抑CTGF表达的CTGF siRNA,为进一步探索更特异、更有效的抗肝纤维化基因治疗这一新途径打下坚实基础.