摘要：在市场营销过程中 ,受高额利润的诱惑 ,许多企业都或多或少地采取一些不合法或不道德的手段来欺骗消费者 ,如劣质产品 ,虚假广告等等 ,而消费者一旦发现上当受骗以后则只能“用脚投票” ,将这些企业扫地出门。出现这种情形 ,除了市场不规范 ,法律不健全之外。很大程度上是企业?（共3页)

摘要：为建立同时检测淡水鱼中华支睾吸虫、东方次睾吸虫和日本全冠吸虫的三重PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的各吸虫参考序列中保守区域设计3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了3种吸虫囊蚴的多重PCR检测方法,并利用该方法对52尾淡水鱼样品中吸虫囊蚴的感染情况进行检测。结果显示,本研究所建立的方法对东方次睾吸虫、华支睾吸虫、日本棘隙吸虫能分别扩增到508 bp、311 bp和208 bp的目的条带,对鸭对体吸虫、舟形嗜气管吸虫、横川后殖吸虫和卷棘口吸虫的基因扩增结果均为阴性,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对3种吸虫囊蚴重组质粒标准品检测下限均为104拷贝/μL。利用该三重PCR方法对淡水鱼临床样品进行检测,结果显示该方法与形态学检测方法结果一致。本研究在国内首次建立了淡水鱼3种吸虫囊蚴多重PCR检测方法,为鱼源性吸虫病的快速检测及鉴别诊断提供了技术手段,为鱼源性寄生虫病的防控奠定了基础。

摘要：为建立一种高效、敏感、特异的用于检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的半巢式RT-PCR方法,本研究依据GenBank发表TGEV的N基因序列设计3条特异性引物,通过优化反应体系,建立了检测TGEV的半巢式RT-PCR方法,并对反应体系特异性和敏感性进行了检测。结果显示,该方法能够成功扩增483 bp和338 bp两条目的条带;对TGEV具有良好的特异性,与猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、猪博卡病毒、猪德尔塔冠状病毒均无交叉反应;最低可检测到1.86×10^-1pg/μL的TGEV cDNA。用所建半巢式RT-PCR对临床50份猪腹泻样品进行检测,结果显示,阳性率为36%,高于普通RT-PCR阳性检出率,且阳性样品符合率为100%。本试验所建立的半巢式RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性好,可准确地对TGEV感染做出诊断,为TGEV的临床检测、流行病学调查提供了有效手段。

摘要：为了建立一种便捷、灵敏而又特异的用于检测猪传染性胃肠炎病毒的反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)基因检测技术,本研究根据比对GenBank中TGEV N基因选取保守序列设计合成了内(FIP,BIP)、外(F3,B3)2对引物,其中外引物扩增片段的大小为200 bp,在Bst DNA聚合酶的作用下对靶序列进行等温核酸扩增反应.本研究对LAMP反应体系中内、外引物的比例、DNA聚合酶浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、反应温度和时间等条件逐一优化,成功建立了猪传染性胃肠炎病毒RT-LAMP快速检测方法.结果表明该方法在61℃下保温45 min即可完成,每个反应可检测DNA至26.5个拷贝,与常规RT-PCR检测方法相比灵敏度高100倍;而且具有良好的特异性.LAMP扩增技术是一种检测程序简便、灵敏度和特异性较高的基因快速检测手段,适合基层和实验室的快速检测,具有一定的开发应用潜力.