摘要：目的:建立敲除人源基因组中SNF5基因的CRISPR/Cas9n系统。方法:设计一对靶向人源SNF5基因第1个外显子的sg RNA,分别克隆至p X461、p X462表达载体后,转入人胚肾293T细胞,通过Western印迹检测细胞株中SNF5基因的敲除效果。结果:测序证明构建的靶向SNF5基因CRISPR/Cas9n重组质粒与设计吻合。Western印迹结果显示,重组质粒p X461-h SNF5sg RNA转染293T细胞后24 h,细胞内SNF5表达水平明显降低;重组质粒p X462-h SNF5sg RNA转染293T细胞后48 h,细胞内SNF5表达水平显著降低。结论:通过CRISPR/Cas9n系统获得了靶向SNF5基因的重组质粒,构建的重组质粒能有效敲除SNF5基因的表达。

摘要：城市更新的方向不是单纯物理空间的拆建,而是将空间改造与产业升级、传承与创新糅杂的生活幸福感相结合,还渗透着_层对土地的尊重,实现从"城市增长"到"城市成长"的跨越式转变。郎官巷在老宁波人的心目中,有着很高的知名度。本项目位于郎官巷内,曾是上世纪四十年代设立的后勤部,在后勤部生活的群众不畏艰难,联合成立了斑马牌眼药水厂。

摘要：新媒体时代,高校思想政治工作不能再固守原有的方式方法,而应积极拥抱新媒体,借助新媒体增强思想政治工作效果。在实际工作中,高校运用新媒体开展思想政治工作存在以下问题:缺乏顶层设计,主流声音被削弱;缺乏优质内容,达不到应有的教育效果;更多地注重新媒体的媒体属性,忽略其他功能。高校应有效运用新媒体开展思想政治工作,坚持党委领导,发挥官方新媒体平台的主导作用;加强新媒体传播规律研究,制作优质内容;培养师生意见领袖,增强正面引导力量;开发新媒体平台更多功能,实现全方位育人。

摘要：“烤古”之寓意，正是去发现原始生活趣味!在远古的石器时代，猛犸象曾是人类重要的狩猎对象，而山洞也是原始人类的生活居所，烧烤所具有的文化属性，是它包含的物质的原味及粗鄙化即食效果中对惯常饮食的反叛，另一面，它则受到人类远祖在渔猎时代的饮食记忆符码的认同。所以，石器时代人类的狩猎对象和生活场所成为了本案设计师想要表达的那个时候的一种社会性场景。

摘要：Web Service作为一门新兴的技术,在中间件技术中有广阔的应用前景。但是,现有的Web Service安全传输方案,不适用于应用层的消息安全保护。因此,这种结合方式将会为消息中间件系统带来安全隐患,无法保证消息中间件的安全消息传递。文中提出了一个基于Web Service技术的合理的中间件模型。并结合消息中间件的特点,在分析Web服务安全技术的基础上,进一步提出了消息中间件的安全传输模型,同时阐述了保证SOAP消息安全传输的基本方法。设计了平台无关的实现方式以体现出应用的透明性。