摘要：目的探讨RNA干扰技术抑制人胶质瘤U251细胞中Aurora A基因的表达,研究其对U251细胞增殖及凋亡的影响。方法设计并合成特异性针对Aurora A基因的siRNA,转染至U251细胞中,采用RT-PCR和Western blotting检测Aurora A mRNA和蛋白的表达情况,同时利用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验和流式细胞仪观察转染后U251细胞增殖抑制率和细胞凋亡,透射电镜观察细胞凋亡超微结构改变。结果转染Aurora AsiRNA后,U251细胞Aurora A mRNA表达受到抑制(P<0.01),蛋白表达水平降低;U251细胞增殖的抑制率和细胞凋亡率显著增高(P<0.01),且U251细胞发生了显著的凋亡形态改变。结论体外合成的针对Aurora A基因的特异性siRNA成功地抑制了U251细胞中Aurora A基因的表达,并能抑制胶质瘤细胞增殖、促进凋亡,提示Aurora A可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点。

摘要：目的观察RNA干扰技术沉默Cyt61基因表达对人脑胶质瘤U251细胞生物学行为的影响。方法针对Cyr61 mRNA的序列设计合成小干扰RNA（siRNA）的DNA模板，构建pR-NAT-Cyt61重组质粒，转染人脑胶质瘤U251细胞；RT-PCR和Westem blot检测其对U251细胞内源性Cyt61表达的影响；用噻唑蓝（MTT）比色法观察U251细胞体外增殖活性的变化；用Transwell小室法检测U251细胞体外侵袭能力的改变；流式细胞仪检测U251细胞凋亡并用透射电镜观察凋亡后的细胞形态学变化。结果pRNAT-Cyt61重组质粒在mRNA及蛋白水平分别显著抑制Cyt61基因表达，抑制率分别最高达到74．87％和78．23％；U251细胞的体外生长抑制率最高达68．15％，侵袭细胞数下降至（46．00±2．82）个；U251细胞凋亡率最高达53．16％。结论pRNAT-Cyt61可抑制Cyr61在人脑胶质瘤U251细胞中的表达，并抑制细胞的增殖活性和侵袭能力，促进细胞凋亡。

摘要：目的观察陷阱受体3（DcR3）反义核苷酸（ASODN）与顺铂对胶质瘤细胞的影响。方法设计DcR3反义核苷酸，转染U251细胞，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Westernblot方法观察DcR3mRNA和蛋白有无降低，用噻唑蓝（MIT）比色法、荧光显微镜DAPI染色分别检测对照组、顺铂组、反义核苷酸组、协同作用组对胶质瘤细胞15251的影响。结果反义DcR3寡核苷酸组可有效地降低DcR3mRNA和蛋白表达，DcR3／β-actin比值分别为（12．4±3．1）％和（13．5±4．2）％，错义链组、脂质体组、对照组mRNA和蛋白分别为（68．8±4．5）％、（74．5±5．0）％、（71．3±6．4）％和（78．2±6．8）％、（79．8±4．5）％、（76．4±5．6）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。顺铂与反义寡核苷酸组细胞凋亡率分别为（18．32±2．32）％和（20．43±3．45）％，较对照组（5．21±O．45）％，差异有统计学意义（P〈0．05），两者与协同处理组（45．23±6．78）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DcR3反义核苷酸与顺铂协同作用可有较强的促胶质瘤细胞凋亡作用。

摘要：目的观察异柠檬酸脱氢酶（IDH）基因突变在神经胶质瘤发生、发展中的作用。方法提取89例胶质瘤蜡块标本DNA，设计合成引物，聚合酶链反应（PCR）扩增覆盖IDHl、IDH2基因4号外显子eDNA片段，正反双向DNA测序，观察基因突变频率和类型，分析基因型与临床表型的关系。结果89例胶质瘤标本中有36例IDH1突变（40．4％）；主要见于Ⅱ、Ⅲ级星形细胞瘤（61％～63％）、少突胶质细胞瘤（33％～66％）以及混合性胶质瘤（57％～80％）；全部为4号外显子R132h杂合性、错义、点突变；各型胶质瘤组中突变型患者多较年轻。结论高频率IDH基因特定催化活性区域碱基突变是胶质瘤发生、发展过程中一种重要的分子事件。

摘要：目的:探讨IDH1基因突变在胶质母细胞瘤发生、发展中所起的作用。方法:通过提取肿瘤细胞DNA、设计合成引物、目的片段PCR扩增、DNA直接测序对胶质母细胞瘤患者IDH1基因4号外显子进行筛查,了解IDH1基因突变频率、位置、类型等,分析基因型与临床表型的关系。结果:在57例胶质母细胞瘤标本中总共发现了19例突变,其中原发胶质母细胞瘤4例,继发胶质母细胞瘤15例,儿童胶质母细胞瘤0例,全部为4号外显子132号密码子杂合性、错义、点突变。结论:IDH1基因突变可能是胶质母细胞瘤发生、发展过程中的重要分子事件,原、继发胶质母细胞瘤,成人、儿童胶质母细胞瘤可能起源于不同的分子机制。