摘要：对隧道洞口"线形应一致"的不同理解,将在隧道洞口线形布设时产生重大影响。结合清连一级公路既有隧道洞口线形布设情况,通过交通事故调查、洞口线形安全性分析,提出正确理解"线形应一致"的看法。同时,对山区高速公路隧道洞口线形设计提出建议,作为清连项目设计的重要依据,也可供其他新建工程或改扩建工程建设项目设计时参考。

摘要：分析连州枢纽互通式立交在路网中地位、转向交通量、匝道布设等方面的特点,提出多个立交方案的比选,最终选择经济、合理的立交方案,总结出山区高速公路枢纽互通式立交方案设计的主要影响因素。

摘要：在摇瓶条件下,利用SAS9.0.2软件中的响应面法对裂殖壶菌发酵生产DHA的培养基进行了优化。首先设计Plackett-Burman实验对影响裂殖壶菌(Schizochytrium ***-512)生产DHA的相关因素进行分析,结果表明,葡萄糖、甘油对DHA产量的影响极显著,(NH4)2SO4对DHA产量影响显著。采用Box-Behnken实验设计和响应面分析方法对Schizochytrium ***-512发酵产DHA复合碳氮源培养基进行了优化。实验优化确定最佳产DHA培养基配方为(g/L):葡萄糖63.94,甘油74.90,(NH4)2SO40.24,酵母浸粉10.00,蛋白胨10.00,海水晶15.00,KH2PO43.5,Mg SO43,维生素B10.005,维生素B120.005。在此优化条件下,Schizochytrium ***-512发酵得到DHA产量可达15.23 g/L,较优化前的6.18 g/L,提高了2.46倍,由此可见,Schizochytrium ***-512具有很好的工业化潜力。实验结果证明用响应面设计方法寻求菌体积累DHA的最佳培养基组分是可行的。

摘要：以清连一级公路为例,探讨了山区公路升级改造中辅道设计的原则、思路和方案。

摘要：裂殖壶菌Schizochytrium ***-512是高产二十二碳六烯酸(DHA)的一株海洋真菌,其细胞内油脂占细胞干质量的18.3%.细胞油脂的总脂肪酸组成为45.7%DHA,12.5%DPA和41.8%棕榈酸.总油脂由26.4%极性脂和73.6%中性脂组成.薄层色谱、高效液相色谱及质谱分析表明该菌株还能合成强抗氧化剂虾青素.采用均匀设计获得高产DHA的最优培养基(g/L):葡萄糖109.7,蛋白胨19.2,酵母膏20.0,海水晶10.4,DHA产量高达2.10 g/L.

摘要：毛霉Mucor ***-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶。为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mcd6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体PYMD6PMCD6连接,获得随机突变质粒PYTBMCD6,转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,构建了原始库容为4.6×104 CFU的△6-脂肪酸脱氢酶的随机突变表达文库。随机突变表达文库的构建与分析为定点突变等酶蛋白的理性设计奠定基础。

摘要：sfa1基因编码的酶具有乙醇脱氢酶和甲醛脱氢酶双功能活性,通过设计含有与sfa1基因两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6和pUG66为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的酿酒酵母sfa1基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS1并将质粒pSH47转入阳性克隆子,诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得sfa1基因缺陷型酵母突变株YS1-sfa1。摇瓶发酵实验表明,突变株YS1-sfa1的乙醇分解代谢活性降低,乙醇产量提高8.0%。

摘要：以深圳市梅观高速公路改扩建工程为背景,简要介绍了高速公路改扩建工程的总体方案论证、建设规模的确定以及关键技术的研究和应用情况,表明了高速公路改扩建已成为今后高速公路建设的重点发展方向。

摘要：设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件。转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株。利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因。最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3。

摘要：目的:通过了解木聚糖酶高产菌株A79的遗传背景,并优化其产木聚糖酶的液体发酵条件,为下一步工业化生产和木聚糖酶制剂的研制奠定基础。方法:通过形态观察和18S rDNA基因的分子系统进化分析,对菌株A79进行鉴定;通过单因素和均匀设计试验,优化其产胞外木聚糖酶的液体发酵条件。结果:通过对18S rDNA基因的分子系统进化分析,菌株A79被鉴定为黑曲霉(Aspergillus nigerA79)。其最佳产酶培养基为:玉米芯5.0%,麸皮0.5%,纤维物质1.0%,玉米浆1.1%,(NH4)2SO40.8%,蛋白胨0.8%,CaCO30.5%,KH2PO40.23%,MgSO4.7H2O 0.08%,微量元素(Mandels)0.08%,pH自然。最佳发酵条件为:接种量5%(2.0×107),28℃2、50r/min振荡培养96h。结论:经优化培养,酶活力由前期的50 000u/ml提高到90 000u/ml,增加了近50%。